Uzročnik tularemije

Tularemija je primarna bolest životinja (glodavaca), kod ljudi se javlja kao akutna zarazna bolest s raznolikom kliničkom slikom i sporim oporavkom. Uzročnika tularemije - Francisella tularensis - otkrili su G. McCoy i S. Chapin 1912. godine tijekom epizootije među vjevericama u području s jezerom Tulare (Kalifornija), detaljno ga je proučio E. Francis, u čiju čast je rod i dobio ime.

To su vrlo mali, veličine 0,2-0,7 µm, kokoidni ili elipsoidni polimorfni štapići, koji vrlo često daju bipolarnu boju kada se koriste posebne metode bojenja; nepokretni su, gram-negativni, ne tvore spore; katalaza-negativni, tvore H2S, strogi aerobi, temperaturni optimum za rast je 37 °C, pH 6,7-7,2. Virulentni sojevi imaju kapsulu, tvore kiselinu bez plina tijekom fermentacije nekih ugljikohidrata (glukoza, maltoza, manoza, fruktoza, dekstrin), stupanj fermentacije varira među sojevima, sadržaj G + C u DNA je 33-36 mol %. F. tularensis ne raste na običnim medijima. G. McCoy i Sh. Chapin koristili su koagulirani žumanjčani medij. Na njemu bacil tularemije raste u obliku nježnih malih kolonija koje nalikuju kapljicama rose, zatim kultura dobiva karakter nježnog šagrenskog premaza sa slabo izraženom sluzavom konzistencijom. E. Francis je predložio hranjivi agar za uzgoj bacila tularemije, koji sadrži 0,05-0,1% cistina, 1% glukoze i 5-10% krvi. Na takvom mediju rast je bujniji i hrapaviji: kolonije su okrugle s glatkom površinom, mliječne boje, vlažne, sluzave konzistencije, okružene karakterističnim zelenim oreolom. Rast je spor, kolonije dosežu svoju maksimalnu veličinu 3-5. dana (1 - 4 mm). Bakterije tularemije dobro se razmnožavaju u žumanjčanoj vrećici pilećeg embrija, uzrokujući njegovu smrt 3-4. dana.

Za rast F. tularensis potrebne su sljedeće aminokiseline: arginin, leucin, izoleucin, lizin, metionin, prolin, treonin, histidin, valin, cistin, za neke podvrste - serin, tirozin, asparaginska kiselina; osim toga, za rast im je potrebna i pantotenska kiselina, tiamin i Mg2 ioni. Uzimajući u obzir ove značajke, sintetski mediji mogu se koristiti za uzgoj F. tularensis.

Rod Francisella pripada klasi Gammaproteobacteria, koljenu Proteobacteria. Ovaj rod također uključuje F. novicida, čija patogenost za ljude nije utvrđena.

Uzročnik tularemije je unutarstanični parazit. Njegova virulencija posljedica je kapsule koja inhibira fagocitozu; neuraminidaze koja potiče adheziju; endotoksina; alergenih svojstava stanične stijenke, kao i sposobnosti razmnožavanja u fagocitima i suzbijanja njihovog ubilačkog učinka. Mehanizmi virulencije još nisu dešifrirani. Osim toga, u bacilu tularemije pronađeni su receptori sposobni za interakciju s Fc fragmentima IgG imunoglobulina. Kao rezultat takvog vezanja, poremećena je aktivnost sustava komplementa i makrofaga.

F. tularensis u S-obliku (virulentnom) ima dva antigena - O i Vi (kapsularni antigen). O-antigen je srodan antigenima Brucelle. Disocijacija S->SR->R dovodi do gubitka kapsule, virulencije i imunogenosti. Vrsta F. tularensis podijeljena je u tri geografske rase (podvrste):

• Holarktički (nisko patogen za domaće kuniće, ne fermentira glicerol i nema enzim citrulin ureidazu, koji se nalazi u zemljama sjeverne hemisfere);
• Srednjoazijski (nisko patogen za kuniće, ima citrulin ureidazu i fermentira glicerol);
• Nearktički (američki), patogeniji za kuniće, fermentira glicerol, ima citrulin ureidazu.

Osim toga, sojevi američke i srednjoazijske podvrste imaju fosfataznu aktivnost, koja je odsutna kod sojeva holarktične podvrste.

[ 1 ], [ 2 ], [ 3 ], [ 4 ], [ 5 ], [ 6 ]

Otpornost uzročnika tularemije

F. tularensis je prilično stabilan u vanjskom okruženju, posebno ako se nalazi u patološkom materijalu. U krmi, žitaricama, kontaminiranoj izmetom bolesnih glodavaca, preživi do 4 mjeseca; u vodi - do 3 mjeseca; u ledu - više od 1 mjeseca. Osjetljiv je na izravnu sunčevu svjetlost (ugine za 30 minuta), visoku temperaturu (na 60 °C ugine za 10 minuta), pod utjecajem 3%-tne otopine lizola, 50%-tnog alkohola, formalina i drugih antiseptika ugine za 5-10 minuta.

Epidemiologija tularemije

Glavni rezervoar tularemije u prirodi su glodavci, među kojima se epizootije opažaju u prirodnim uvjetima. Ljudi se zaraze samo od životinja; patogen se ne prenosi s osobe na osobu. Patogen je pronađen kod 82 vrste glodavaca i lagomorfa, a najčešće se nalazi kod predstavnika 4 porodice: mišoliki glodavci (Muridae), zečevi (Leporidae), vjeverice (Sciuridae) i skočkići (Dipodidae). U Rusiji su glavni prijenosnici mišoliki glodavci: vodeni štakori, obične voluharice, kućni miševi i bizamski štakori.

Prema osjetljivosti na tularemiju, životinje se mogu podijeliti u četiri skupine:

• Skupina 1 - najosjetljiviji (voluharice, vodeni štakori, kućni miševi, bijeli miševi, zamorci i neki drugi). Minimalna smrtonosna doza je jedna mikrobna stanica;
• 2. skupina - manje osjetljive (sivi štakori, goferi itd.). Minimalna smrtonosna doza je 1 milijarda mikrobnih stanica, međutim, jedna mikrobna stanica je dovoljna da zarazi neke od njih;
• 3. skupina (predatori - mačke, lisice, tvorovi). Otporni na visoke zarazne doze, bolest se odvija bez vidljivih manifestacija;
• Grupa 4 - imuni na tularemiju (papkari, hladnokrvne životinje, ptice).

Za ljude je minimalna zarazna doza jedna mikrobna stanica. Ljudi se mogu zaraziti na sve moguće načine: izravnim i neizravnim kontaktom s bolesnim glodavcima, njihovim leševima ili predmetima zaraženim glodavcima; alimentarno (konzumiranjem hrane i vode zaražene glodavcima), prašinom u zraku i prijenosom. Infekcija bakterijom tularemije utvrđena je kod 77 vrsta člankonožaca koji sišu krv. Od posebne su važnosti iksodidni krpelji, kod kojih uzročnik perzistira tijekom cijelog života, pa se čak i transovarijalno prenosi na potomstvo. Ove okolnosti doprinose uspostavljanju bolesti u prirodi. Ljudi se zaraze krpeljima ne ugrizima, već kao posljedica dospijeća uzročnika na kožu zajedno s izmetom krpelja.

U Rusiji postoji 7 glavnih tipova krajobraza prirodnih žarišta tularemije: močvara, livadsko-polje, stepa, šuma, podnožje, tundra i tugaj (pustinja).

[ 7 ], [ 8 ], [ 9 ], [ 10 ]

Simptomi tularemije

Uzročnik tularemije prodire u tijelo kroz vanjske ovojnice (oštećenu i neoštećenu kožu i sluznice). Na mjestu prodiranja često se stvaraju ulceracije. Kroz limfne žile bakterije ulaze u regionalni limfni čvor i u njemu se slobodno razmnožavaju; upalni proces dovodi do stvaranja bubona. Odavde patogen prodire u krv, bakterijemija uzrokuje generalizaciju procesa, u njega su uključeni različiti organi i tkiva, proliferacija bakterija u kojima dolazi do stvaranja granuloma i nekrotičnih ulkusa. Alergijsko restrukturiranje tijela povezano je s bakterijemijom i generalizacijom. Inkubacijski period tularemije varira od 2 do 8 dana. Bolest počinje akutno: pojavljuju se vrućica, glavobolja, bolovi u mišićima, hiperemija lica. Daljnji tijek ovisi o mjestu ulaznih vrata, prema kojem se razlikuju sljedeći klinički oblici tularemije: ulcerativno-glandularna (bubonska), očno-glandularna, angino-glandularna, abdominalna i plućna. Mortalitet kod tularemije ne prelazi 1-2%.

Postinfektivni imunitet je jak, perzistentni, u većini slučajeva doživotni, ima staničnu prirodu, uzrokovan je uglavnom T-limfocitima i makrofagima, u manjoj mjeri - antitijelima. Fagocitoza kod osoba s imunitetom je potpuna.

Laboratorijska dijagnostika tularemije

Za dijagnosticiranje tularemije koriste se sve mikrobiološke metode. Istraživanje se provodi u sigurnim laboratorijima. Materijal za istraživanje - krv, bubopunkcija, struganje ulkusa, iscjedak iz konjunktive, faringealni plak, sputum itd. - određen je kliničkim oblikom bolesti. Osim toga, za istraživanje se mogu uzeti voda i prehrambeni proizvodi. U prirodnim žarištima tularemije provode se planirana sustavna istraživanja kako bi se uzročnik tularemije izolirao od glodavaca.

Bakteriološka metoda dijagnosticiranja tularemije kod ljudi rijetko daje pozitivne rezultate. Čista kultura se obično izolira nakon nakupljanja na osjetljivim laboratorijskim životinjama. Bijeli miševi i zamorci se koriste za biološke testove. Miševi se zaraze potkožno, zamorci - intraperitonealno; životinje uginu 3.-6. dana, ponekad nakon mraza. Zaražene životinje drže se u posebnim uvjetima (kao kod dijagnosticiranja kuge) i promatraju se 6-14 dana. Pokusne životinje ne uginu 7-15 dana, kolju se 15.-20. dana, a leševi se obduciraju. U prisutnosti tularemije otkrivaju se patološke i anatomske promjene u obliku produktivnog procesa s nekrozom. Čista kultura se izolira iz unutarnjih organa na žumanjčanom mediju, glukozno-cisteinskom krvnom fokusu itd. Identifikacija se temelji na morfologiji i tinktorijskim svojstvima patogena, odsutnosti rasta na MPA i aglutinaciji s homolognim serumom. patogenost za bijele miševe i zamorce. Čista kultura može se izolirati infekcijom 12-dnevnih pilećih embrija i žumanjčane vrećice. Za izolaciju čiste kulture patogena iz vode, ona se centrifugira ili filtrira kroz bakterijske filtere, a talog se koristi za infekciju laboratorijskih životinja. Prilikom proučavanja prehrambenih proizvoda, oni se ispiru s MP B, centrifugiraju, a talog se koristi za infekciju laboratorijskih životinja.

Istodobno s bakteriološkim pregledom, iz proučavanog materijala pripremaju se razmazi-otisci i boje se prema Romanovsky-Giemsi. U razmazima s organa mogu se otkriti male kokoidne i štapićaste bakterije koje se nalaze unutarstanično i u obliku nakupina, tvoreći nježnu kapsulu.

Za dijagnostiku se koriste detaljna reakcija aglutinacije, RPGA i RIF.

Za ranu dijagnostiku tularemije (od 5. dana nakon početka bolesti) koriste se alergijski testovi. Koriste se dvije vrste tularina i, sukladno tome, dvije metode njihove primjene: kožni i intradermalni. Budući da je koncentracija alergena u obje vrste tularina različita, neprihvatljivo je koristiti kožni tularin za intradermalni test i obrnuto. Rezultati alergijske reakcije uzimaju se u obzir dinamički nakon 24, 36, 48 sati. Infiltrat promjera najmanje 5 mm smatra se pozitivnim rezultatom. Kod cijepljenih osoba ili onih koji su preboljeli tularemiju, alergijski testovi ostaju pozitivni niz godina (anamnesička reakcija).

Specifična prevencija tularemije

Za specifičnu prevenciju koristi se cjepivo protiv tularemije, koje su 1930. godine dobili ruski vojni liječnici B. Ya. Elbert i NA Gaisky iz soja Me 15. Cjepivo pruža snažan imunitet 5-6 godina prilikom infekcije europskom i holarkičkom podvrstom te je učinkovito protiv američke varijante patogena. Cijepljenje se provodi prema epidemiološkim indikacijama, kao i za osobe koje pripadaju rizičnim skupinama. Dopušteno je istovremeno cijepljenje protiv tularemije i bruceloze; tularemije i kuge, kao i protiv tularemije i nekih drugih infekcija.

Nespecifična prevencija tularemije ista je kao i kod ostalih zoonoza i usmjerena je prvenstveno na suzbijanje glodavaca.