Virus hepatitisa E

Virus hepatitisa E (HEV) ima sferni oblik, promjera 27-34 nm, tip simetrije nukleokapside je ikosaedarski, nema vanjsku membranu.

Virus hepatitisa E identificiran je u izmetu pacijenata koji su imali ne-A, ne-B virusni hepatitis enteralnim putem infekcije, kao i u izmetu pokusnih životinja (majmuna) zaraženih istim materijalom koji sadrži virus, korištenjem imunološke elektronske mikroskopije (IEM) s korištenjem seruma rekonvalescenata ovog hepatitisa.

Do danas je utvrđeno da virus hepatitisa E ima sljedeće fizikalno-kemijske i biološke karakteristike.

• Morfološki je predstavljen sfernim česticama bez ljuske; njihova površina ima šiljke i udubljenja; virus se raspada kada je izložen CS CL, smrzavanju/odmrzavanju, a čuva se na -20 °C.
• Promjer virusnih čestica je od 32 do 34 nm.
• Genom je predstavljen RNK dugom 7,5 kb, jednolančanom, poliadeniliranom.
• Koeficijent sedimentacije je 183 S (za defektne čestice slične virusu - 165 S). Gustoća uzgona je 1,29 g/cm3 ^u gradijentu KTa/Glu.
• Kultivacija in vitro nije bila uspješna.
• Intracerebralna primjena suspenzije fekalnog ekstrakta koji sadrži HEV čestice miševima koji sišu ne uzrokuje bolest kod njih.

Molekularnim kloniranjem dobivene su velike količine HEV-a iz žuči zaraženih makak majmuna. Demonstriran je identitet virusnih čestica dobivenih iz fekalnih ekstrakata pacijenata s hepatitisom E u raznim regijama svijeta (Somalija, Borneo, Pakistan, Srednja Azija itd.). Struktura genoma HEV-a praktički je dešifrirana. Analizom nukleotidnih sekvenci i organizacije genoma utvrđeno je da se HEV razlikuje od pikornavirusa i da ne može pripadati kalicivirusima (kalicivirusima), kako se u početku pretpostavljalo.

Genom je predstavljen jednolančanom nefragmentiranom pozitivnom RNA od 7500 baza, sadrži tri otvorena okvira za čitanje koji kodiraju proteine specifične za virus. Na površini viriona nalaze se udubljenja koja nalikuju čašicama (grčka čaška), stoga je virus u početku uvršten u porodicu Caliciviridae (rod Hepavirus). Detaljnije proučavanje genoma HEV pokazalo je da je nukleotidni slijed njegove RNA jedinstven i ima samo određenu sličnost s virusom rubeole.

HEV je trenutno klasificiran kao član porodice Hepereviridae, roda Heperevirus, virusa hepatitisa E.

HEV antigen(i) - HEV Ag identificiran je na površini virusnih čestica pomoću imunološke elektronske mikroskopije, u hepatocitima - imunohistokemijskim metodama. Kod eksperimentalnih životinja (makakija i čimpanza) oboljelih od hepatitisa E, HEV Ag je detektiran u citoplazmi hepatocita pomoću imunofluorescentne metode pri nanošenju slojeva jetre sa serumima istih životinja dobivenim tijekom razdoblja oporavka; specifičnost HEV Ag naknadno je potvrđena u studijama apsorpcije korištenjem rekombinantnih proteina dobivenih kloniranjem HEV genoma.

U imunomorfološkim studijama majmuna zaraženih hepatitisom E, granularni depoziti HEV Ag lokalizirani su u citoplazmi hepatocita, pri čemu su granule koje sadrže HEV Ag bile nasumično raspoređene, a broj granula značajno je varirao u različitim stanicama. Nije otkrivena preferencijalna lokalizacija HEV Ag-pozitivnih hepatocita u bilo kojoj određenoj zoni lobula jetre. Hepatitis koji sadrži HEV Ag konstantno je detektiran prije povećanja aktivnosti ALT-a, zatim je perzistirao tijekom cijelog razdoblja hiperenzimemije i praktički nestao nakon normalizacije aktivnosti ALT-a.

Genomske sekvence HEV-a identificirane su u izmetu, žuči i krvnom serumu pacijenata s hepatitisom E u ljudi i eksperimentalnih životinja (majmuna); humoralni imunološki odgovor proučavan je od akutne faze bolesti do rekonvalescencije.

Najviša koncentracija HEV čestica otkrivena je u žuči zaraženih makakija prije vrhunca aktivnosti ALT u fazi infekcije, kada je zabilježen vrhunac prisutnosti HEV Ag u jetri.

HEV RNA pronađena je u uzorcima stolice, žuči i seruma zaraženih ljudi i primata.

Prisutnost specifičnih antitijela (anti-HEV) u krvnom serumu pacijenata s hepatitisom E u ljudi i eksperimentalnih životinja utvrđena je imunološkom elektronskom mikroskopijom i metodom fluorescentnih antitijela korištenjem preparata HEV čestica ili presjeka jetre koji sadrže HEV Ag kao supstrat.

Daljnje presječne studije izolata HEV-a i seruma rekonvalescenata dobivenih od pacijenata u različitim geografskim regijama gdje su se pojavile epidemije ili sporadični slučajevi hepatitisa E, kao i HEV čestica i seruma dobivenih od primata zaraženih tim izolatima, konačno su uvjerile istraživače da postoji jedan virus (ili klasa serološki srodnih virusa) odgovoran za hepatitis E diljem svijeta.

Prikazana je genotipska raznolikost HEV-a. Identificirano je osam genotipova virusa, čiji su glavni prototipovi sljedeći izolati: genotip 1 - HEV izolat iz Burme, 2 - iz Meksika, 3 - iz SAD-a, 4 - iz Tajvana i Kine, 5 - iz Italije, 6 - iz Grčke, 7 - iz Grčke (drugi izolat), 8 - iz Argentine.

Pokazano je da u akutnoj fazi hepatitisa E kod makakija i čimpanza, anti-HEV klase IgM i IgG cirkuliraju u krvnom serumu, dok u serumima razdoblja rekonvalescencije cirkuliraju samo anti-HEV klase

U brojnim studijama, anti-HEV IgM je otkriven kod 73% pacijenata s hepatitisom E u prvih 26 dana od početka žutice; tijekom razdoblja oporavka, anti-HEV IgG je otkriven kod 90% pacijenata.

Izvor zaraze su isključivo ljudi, uzročnik se izlučuje izmetom. Mehanizam zaraze je fekalno-oralni. Glavni put zaraze je putem vode kontaminirane izmetom. Zarazna doza je znatno veća od one kod virusa hepatitisa A. Osjetljivost na HEV virus je univerzalna. Epidemije mogu zahvatiti desetke tisuća ljudi ako se prekrši režim pijenja, posebno tijekom sezonskih radova ljeti i u jesen.

Klinički, hepatitis E je blaži od hepatitisa A, a prijelaz u kronični oblik nije zabilježen. U 85-90% pacijenata hepatitis E je blag ili umjeren, često asimptomatski. Međutim, kod trudnica hepatitis E je težak, sa stopom smrtnosti do 20%.

Za dijagnostiku se koristi imunološka elektronska mikroskopija; predložen je testni sustav za otkrivanje antitijela na HEV antigene. Imunitet nakon infekcije je snažan, doživotan i posljedica je antitijela koja neutraliziraju virus i imunoloških memorijskih stanica. Za specifičnu profilaksu predloženo je cjepivo s cijelim virionom, a razvijaju se živa i rekombinantna cjepiva.

[ 1 ], [ 2 ], [ 3 ], [ 4 ], [ 5 ], [ 6 ], [ 7 ], [ 8 ], [ 9 ]