Medicinski stručnjak članka
Nove publikacije
Southern blotting
Posljednji pregledao: 05.07.2025
Svi iLive sadržaji medicinski se pregledavaju ili provjeravaju kako bi se osigurala što je moguće točnija činjenica.
Imamo stroge smjernice za pronalaženje izvora i samo povezujemo s uglednim medijskim stranicama, akademskim istraživačkim institucijama i, kad god je to moguće, medicinski pregledanim studijama. Imajte na umu da su brojevi u zagradama ([1], [2], itd.) Poveznice koje se mogu kliknuti na ove studije.
Ako smatrate da je bilo koji od naših sadržaja netočan, zastario ili na neki drugi način upitan, odaberite ga i pritisnite Ctrl + Enter.
Southern blotting (razvili E. Southern i R. Davis 1975.) glavna je metoda koja se trenutno koristi za identifikaciju gena za određenu bolest. Za to se DNK ekstrahira iz pacijentovih stanica i tretira s jednom ili više restrikcijskih endonukleaza. Dobiveni fragmenti podvrgavaju se elektroforezi, što omogućuje njihovo odvajanje po veličini (manji fragmenti brže se kreću kroz pore gela). Fragmenti se zatim prenose (ponovno ispisuju) na nitrocelulozni filter, na koji se nanosi radioaktivno obilježena sonda. Sonda se veže samo na komplementarnu sekvencu. Zatim se, pomoću autoradiografije, određuje položaj željenog fragmenta genomske DNK na elektroferogramu.
Hibridizacija s označenom DNA sondom DNA ili RNA pripravaka nanesenih kap po kap na čvrstu matricu bez prethodne restrikcije i elektroforeze naziva se točkasta ili utorna hibridizacija, ovisno o konfiguraciji DNA točke na filteru (okrugla ili duguljasta).
[