Analiza osjetljivosti na antibiotike: priprema, dekodiranje, koliko je učinjeno

Danas je analiza osjetljivosti na antibiotike sve popularnija. Čovjekova mikroflora je vrlo različita, zastupljena velikim brojem mikroorganizama, u različitim biotopima.

Farmaceutske tvrtke razvile su veliki broj antibakterijskih sredstava, antibiotika, koji omogućuju održavanje normalnog omjera i broja mikrobnih populacija. Od početka ere antibiotika, mnoge bolesti koje su prethodno smatrale smrtonosne su izliječene. Ali mikroorganizmi također imaju tendenciju preživljavanja, postupno prilagođavajući se djelovanju antibakterijskih lijekova. Tijekom vremena, mnogi od njih postali su otporni na mnoge lijekove, konsolidirali su ga u genotipu i počeli su proći od generacije u generaciju. Dakle, novi mikroorganizmi već nisu u početku osjetljivi na određene lijekove, a njihova svrha može biti neučinkovita. Ljekarnici razvijaju sve više novih proizvoda, dodaje im nove aktivne sastojke, mijenjajući osnovnu formulu. Ali postupno, oni također razvijaju otpor.

Razlog povećane otpornosti mikroflora na mnoge lijekove, pa čak i njihovi analozi često su skriveni u pogrešnom i nekontroliranom unosu antibiotika. Liječnici propisuju antibiotike i njihove kombinacije za različite bakterijske bolesti. Istodobno, ne postoji preliminarna procjena učinkovitosti, optimalna doza se ne bira, što je vrlo važno kako za liječenje tako i za sprječavanje mehanizama za razvoj daljnjeg otpora. Mnogi pogrešno propisuju antibakterijsku terapiju čak iu virusnim bolestima, što je neučinkovito, jer antibiotik ne djeluje protiv virusa.

Terapija se često propisuje bez preliminarnog ispitivanja osjetljivosti, odabir aktivnog agensa i potrebna doza za svaku specifičnu bolest i biotop se ne provodi. Budući da su antibiotici propisani "slijepim", često postoje slučajevi kada ne pokazuju aktivnost prema mikroorganizmima koji su uzrokovali bolest i čiji se broj treba smanjiti. Umjesto toga, oni utječu na druge predstavnike mikroflore, što rezultira disbiosom, što je također prilično opasna patologija i može dovesti do ozbiljnih posljedica. Posebno su opasni slučajevi kada antibiotik uništi normalnu mikroflora, koja je dizajnirana za zaštitu tijela i održavanje normalnog funkcioniranja. Također, postoje slučajevi kada je propisano previše ili premalo doza.

Pacijenti su također neodgovorni za liječenje. Često, liječenje je prekinuto nakon što simptomi prestanu brinuti. Istodobno, mnogi ljudi više vole završiti cijeli tečaj do kraja. Ovo je jedan od čimbenika koji doprinose razvoju otpornosti u bakterijama. Cijeli tečaj osmišljen je za potpuno patogene mikroflore. Ako tečaj nije završen, nije potpuno ubijen. Ti mikroorganizmi koji preživljavaju, podvrgavaju mutacijama, razvijaju mehanizme koji im pružaju zaštitu od ovog lijeka i prenose ih na sljedeće generacije. Opasnost je da se otpor razvija ne samo u odnosu na ovaj lijek, već i na cijelu grupu lijekova.

Stoga je za danas jedan od najučinkovitijih načina racionalne terapije i prevencije otpora preliminarno određivanje osjetljivosti na agent koji se primjenjuje i odabir njezine optimalne doze.

[1], [2], [3], [4], [5], [6], [7], [8]

Indikacije za postupak ispitivanje osjetljivosti na antibiotike

Obično se takva analiza mora provesti u svim slučajevima kada je potrebna antibakterijska terapija. Polazeći od osnovnih zakona antibiotske terapije, bilo koji antibiotik može se propisati tek nakon što je napravljena preliminarna procjena osjetljivosti mikroflore na ovaj agens, u laboratorijskim uvjetima određena je optimalna koncentracija aktivne tvari. U praksi, zbog različitih razloga i okolnosti, takva studija prije početka liječenja nije provedena, a liječnik je prisiljen odabrati lijek "slučajnim".

Danas se ispitivanje osjetljivosti obavlja samo u onim slučajevima kada liječnik ima veliku sumnju da li će namjeravani lijek biti učinkovit, u slučaju dugotrajnog odsutnosti učinka lijeka, kao i kod ponovljene uporabe istog agensa u ograničenom vremenskom razdoblju. Često se određuje osjetljivost u liječenju spolno prenosivih bolesti. Mnogi stručnjaci se obraćaju analizi u slučaju nuspojava, alergijskih reakcija i kada je potrebno zamijeniti jedan lijek drugom.

Također se često spominju i za odabir lijekova za antibiotsku terapiju tijekom razdoblja oporavka nakon operacije, laparoskopske intervencije i uklanjanja organa. U otdleniyah operacije, gnojna kirurgija takvo istraživanje je potrebno, jer se brzo razvija ustoychivost.krome razvoja superstable „bolničkih” Mnogi privatne klinike su pogodni za lijekove na recept s punom odgovornošću - tek nakon testiranja osjetljivosti. U mnogim slučajevima, proračun javnih institucija jednostavno ne dopušta takve studije da se provode za svakog bolesnika koji treba antibiotsku terapiju.

[9], [10], [11]

Priprema

Priprema za studiju ne zahtijeva posebne mjere. To je isto kao u bilo kojoj analizi. Nekoliko dana prije studija morate se suzdržati od konzumiranja alkohola. Ujutro, na dan uzimanja uzoraka, u većini slučajeva ne možete jesti i piti. Ali sve ovisi o vrsti analize. Materijal za istraživanje može biti različit, ovisno o bolesti.

S bolestima grla, dišnog trakta, uzeti obrisak iz grla, nosa. U venereologiji, ginekologiji, urologiji, uzeti za analizu briseva iz genitalija, krv. Uz bubrežnu bolest često je potrebna mokraća. Uz bolesti probavnog trakta, neke zarazne bolesti, ispitati izmet, povraćati. Ponekad se može istražiti majčino mlijeko, nazalni iscjedak, izlučivanje očiju, sline, ispljuvak. U teškim patologijama i sumnji na zarazni proces, pregledava se i spinalna tekućina. Spektar je dovoljno širok.

Priroda unosa materijala određena je njezinom biološkom pripadnošću. Tako se urin, izmet skuplja ujutro u čistom spremniku ili u poseban spremnik za biološki materijal. Zbirka majčinog mlijeka izvodi se prije hranjenja. Studija ima prosječni udio. Umak se uzima s posebnim tamponom, koji se nosi na sluznici, zatim spušta u ispitnu epruvetu s pripremljenim medijem. Krv se skuplja u epruveti, iz prsta ili venske. Prilikom uzimanja briseva iz uretre ili vagine, preporuča se nekoliko dana da se suzdrže od spolnog odnosa.

Prilikom sakupljanja biološkog materijala za istraživanje, prvo je potrebno osigurati ispravnost ograde i sterilnosti. Ali to je u većini slučajeva briga medicinskog osoblja, pacijent ne bi trebao biti zabrinut zbog toga. Najčešće se ginekolozi i urolozi obraćaju sličnim studijama, a na drugom mjestu - otorinolozi u liječenju bolesti nazofarinksa i ždrijela, gornjeg respiratornog trakta.

[12], [13], [14]

Tehnika ispitivanje osjetljivosti na antibiotike

Prikupljeni biološki materijal pod sterilnim uvjetima unosi se u laboratorij, gdje se provode daljnja ispitivanja. Prvenstveno, njegovo primarno sijanje izvodi se na univerzalnim medijima hranjivih tvari. Uzima se i dio materijala za mikroskopski pregled. Priprema se test za mikroskopiju, provodi se studija pomoću koje se može utvrditi približna slika, što ukazuje na koji su mikroorganizmi prisutni u uzorku. To omogućuje prilagodbu najoptimalnijih okruženja za daljnja istraživanja i identifikaciju mikroorganizama. Također, na mikroskopiji mogu postojati znakovi koji ukazuju na upalu, onkološki proces.

Nekoliko dana u Petrijevu zdjelu rastu kolonije mikroorganizama. Zatim se uzme nekoliko kolonija, prelaze u selektivne hranjive tvari, koje omogućuju određivanje približne skupine mikroorganizama. Inkubirati nekoliko dana u termostatu, a zatim nastaviti prepoznati (odrediti vrstu mikroorganizama). Identifikacija se provodi uz pomoć posebnih biokemijskih i genetskih testova, odrednica. Osim toga, može se provesti imunološki nadgledanje.

Nakon izolacije glavnog patogena, provesti procjenu njegove osjetljivosti na antibiotike. Postoji nekoliko metoda za to. Najčešće korištena metoda serijskog razrjeđivanja, ili disk-difuzijske metode. Tehnike su detaljno opisane u mikrobiološkim referentnim knjigama, metodološkim smjernicama i laboratorijskim standardima.

Bit disko-difuzijske metode sastoji se od zasijavanja mikroorganizama koji su identificirani na hranjivom mediju, posebni diskovi impregnirani antibioticima postavljeni su na vrh. U roku od nekoliko dana, usjev se inkubira u termostatu, a zatim se rezultati izmjere. Procjenjujte stupanj retardacije rasta bakterija svakim antibiotikom. Ako je bakterija osjetljiva na antibiotik, oko diska se stvara "zona liza", u kojoj se bakterije ne reproduciraju. Njihov rast je spor ili potpuno odsutan. Promjer zone usporavanja rasta određuje se stupnjem osjetljivosti mikroorganizma na antibiotik i formulira daljnje preporuke.

Metoda serijskog razrjeđivanja je najtočnija. Da bi se to postiglo, mikroorganizmi se sije na tekući hranjivi medij, dodati antibiotik razrijeđen u sustavu decimalnih razrjeđenja. Nakon toga, epruvete se stavljaju nekoliko dana u termostat za inkubaciju. Osjetljivost na antibiotike određena je stupnjem rasta bakterija u hranjivoj juhi uz dodatak antibiotika. Zapišite minimalnu koncentraciju u kojoj se rast mikroorganizama još uvijek javlja. Ovo je minimalna doza lijeka (nužno je ponovo izračunati mikrobiološke jedinice na aktivnu tvar).

To su standardne mikrobiološke metode koje su temelj svakog istraživanja. Oni podrazumijevaju ručno izvršenje svih manipulacija. Danas su mnogi laboratoriji opremljeni posebnom opremom koja obavlja sve te postupke u automatskom načinu rada. Specijalist koji radi s takvom opremom treba samo sposobnost rada s opremom, pridržavanjem pravila sigurnosti i sterilnosti.

Treba uzeti u obzir da su indeksi osjetljivosti u laboratoriju i uvjetima živog organizma bitno različiti. Stoga je osobi veću dozu nego što je određeno tijekom studije. To je zbog činjenice da tijelo nema takve optimalne uvjete za rast bakterija. U laboratoriju se stvaraju "idealni uvjeti". Dio lijeka može se neutralizirati djelovanjem sline, želučanog soka. Taj dio neutralizira se u krvi protutijelima i antitoxinima, koji su proizvedeni imunološkim sustavom.

Analiza urina za osjetljivost na antibiotike

Za početak se prikuplja biološki materijal. Da biste to učinili, morate prikupiti prosječni dio ujutro mokraće i dostaviti ga u laboratorij. Važno je promatrati sterilnost i ne uzimati antibiotike nekoliko dana prije analize, inače možete dobiti lažni negativni rezultat. Nakon toga se proizvodi standardni usjev, čija je bit izolacija čiste kulture patogena i odabir antibiotika koji će imati najbolji baktericidni učinak na njega. Utvrđena je potrebna koncentracija antibiotika.

Analiza urina najčešće je propisana zbog sumnje na zarazni i upalni proces u genitourinarni sustav, s imunodeficijencijama i metaboličkim poremećajima. Uobičajeno, urin je sterilna tekućina. Trajanje takve studije je 1-10 dana i određuje se brzinom rasta mikroorganizma.

Analiza kulture i osjetljivost na antibiotike

Studija podrazumijeva izolaciju mikroorganizma koji je uzročnik u čistoj kulturi. Ponekad takvi mikroorganizmi mogu biti nekoliko (mješovita infekcija). Neki mikroorganizmi mogu stvoriti biofilmove, koje su osebujne "mikrobne zajednice". Preživljavanje biofilmova mnogo je veći od pojedinačnih mikroorganizama ili udruga. Osim toga, nisu svi antibiotici sposobni utjecati na biofilma i prodrijeti u njega.

 Da bi se odredio patogen, njegova se izolacija u čistu kulturu izvodi. Tijekom istraživanja, uzgaja se nekoliko usjeva, u različitim medijima hranjivih tvari. Tada se dodjeljuje čista kultura, određuje se biološko značenje, određuje se osjetljivost na antibakterijske lijekove. Odabrana je optimalna koncentracija.

Za istraživanje, svaki biološki materijal može se koristiti, ovisno o bolesti, lokalizaciji zaraznog procesa. Trajanje se određuje brzinom rasta mikroorganizama.

[15], [16], [17], [18], [19], [20]

Fekalna analiza osjetljivosti

Izmet se ispituje za različite želučane i crijevne bolesti, s sumnjom na zarazni proces, bakterijsko opijanje, trovanja hranom. Cilj istraživanja je izoliranje patogena i odabir optimalnih antibakterijskih lijekova koji će biti vrlo aktivni. Važnost ovog tipa istraživanja je da je moguće odabrati lijek koji će samo utjecati na uzročnik ove bolesti i neće utjecati na predstavnike normalne mikroflore.

Prva i vrlo značajna pozornica je zbirka stolice. Mora se sakupljati u posebnom sterilnom spremniku u jutarnjim satima. Ne držite više od 1-2 sata. Žene s menstruacijskim protokom trebale bi odgoditi analizu do kraja, jer će se preciznost rezultata promijeniti. Materijal se dostavlja laboratoriju na pregled. Analiza se provodi primjenom standardne mikrobiološke tehnike inokulacije i izolacije čiste kulture. Uz to, izveden je antibiotikogram. Prema zaključku, izrađuju se preporuke, određuje se daljnja shema istraživanja.

[21], [22], [23], [24]

Analiza disbioze s osjetljivosti

Materijal za proučavanje je izmet koji se uzima odmah nakon čišćenja. Normalna gastrointestinalna mikroflora sastoji se od predstavnika normalne flore i nekoliko predstavnika patogene flore. Sastav, broj i omjer njihovih vrsta strogo su označeni i zadržani unutar dopuštene norme. Ako se takav odnos prekrši, razvija se disbakterija. Može se manifestirati na različite načine. Zarazne bolesti mogu se razviti ako se količina patogenih mikroflora oštro povećava. Ako se količina bilo kojeg mikroorganizma drastično smanji, drugi zastupnici zauzimaju slobodno mjesto koje nije karakteristično za gastrointestinalni trakt ili patogeni. Često praznu stolicu zauzima gljiva, potom nastaju razne gljivične lezije, kandidijaza.

Da bi se utvrdio kvantitativni i kvalitativni sastav crijevne mikroflore, izmet se analizira za disbakterizu. Uvjetno, svi su predstavnici crijeva podijeljeni u tri skupine: patogeni, oportunistički i nepatogeni. Prema tome, analiza se sastoji od tri dijela. Svaka skupina mikroorganizama ima svoje potrebe u izvoru prehrane, energije. Za svaku skupinu potrebni su odvojeni nutrijenti i selektivni aditivi.

Prvo se provodi mikroskopija i primarno sijanje. Nakon sjetve odabiru se najveće kolonije, morfološki slične predstavnicima svake skupine. Proizvedeno preoblikovanjem na selektivne medije. Nakon što su mikroorganizmi rasli, identificirani su i odmah testirani na osjetljivost na antibiotike. Koriste se standardne mikrobiološke metode.

Istraživanje skupine patogenih mikroorganizama, uz standardne studije, uključuje identifikaciju bakterija tifusa, paratifida i dizenterije. Također se određuje je li osoba nositelj tih mikroorganizama. Sveobuhvatna studija disbioze također uključuje istraživanje predstavnika skupine bifidobakterija i laktobacila. Studija traje oko tjedan dana i ovisi o brzini rasta mikroorganizama.

[25], [26], [27], [28], [29]

Analiza osjetljivosti na bakteriofage

Kada je crijevna infekcija za liječenje često koristila bakteriofage umjesto antibiotika. Bakteriofagi su virusi bakterija koji su osjetljivi samo na njih. Pronađuju bakteriju kojom su komplementarni, prodiru u nju i postupno uništavaju bakterijsku stanicu. Kao rezultat toga, proces infekcije prestaje. Ali nisu sve bakterije osjetljive na bakteriofage. Da bi se provjerilo da li ovaj bakteriofag djeluje protiv predstavnika mikroflore, mora se provesti analiza.

Materijal studije je kal. Analiza se treba dostaviti u laboratorij u roku od jednog sata, inače neće biti moguće. Potrebno je provesti analizu u nekoliko replikata. Izvorna tehnika je slična onoj u određivanju osjetljivosti na antibiotike. Prvo se provodi preliminarna mikroskopija uzorka, zatim primarno zasijavanje na univerzalnim medijima hranjivih tvari. Zatim se proizvodi selektivna kultura na selektivnom mediju hranjivih tvari.

Glavni rad se provodi uz čistu kulturu. Oni se liječe različitim tipovima bakteriofaga. Ako se kolonija otapa (lizu), to ukazuje na veliku aktivnost bakteriofaga. Ako liza postane djelomično - bakteriofag djeluje umjereno. U nedostatku lize može se govoriti o otpornosti na bakteriofag.

Prednost terapije fagom je da bakteriofagi ne utječu na ljudsko tijelo, ne uzrokuju nuspojavu. Pridružuju se određenim vrstama bakterija i liziraju ih. Nedostatak je što su vrlo specifični i imaju selektivni učinak, a ne mogu se uvijek povezivati s bakterijama. 

[30], [31], [32], [33], [34], [35], [36], [37], [38]

Sputum analiza za osjetljivost na antibiotike

Analiza je studija odvojive donjeg respiratornog trakta. Cilj je utvrditi vrstu mikroorganizama koji djeluju kao uzročnici bolesti. Također se izvodi antibiotikogram. U ovom slučaju određuje se osjetljivost patogena na antibiotike i odabire optimalnu koncentraciju. Koristi se za bolesti dišnog sustava.

Ispitivanje sputuma i drugih sadržaja pluća i bronha je neophodno za odabir terapijske sheme za razlikovanje različitih dijagnoza. Koristi se za potvrdu ili odbijanje prisutnosti tuberkuloze.

Najprije morate dobiti biološki materijal. Može se postići kašljivanjem, ekspektoriranjem ili dohvaćanjem iz traheje s bronhoskopijom. Postoje posebni aerosoli koji pridonose iskašljavanju. Prije uzimanja sputuma, usta treba isprati vodom, što će smanjiti stupanj bakterijske kontaminacije usne šupljine. Najprije se preporuča uzeti 3 duboka udisaja kako bi se prouzročio produktivni kašalj. Sputum se također može uzeti aspiracijom iz traheje. U ovom slučaju, posebni kateter umetnut je u traheju. Kada se bronhoskopija unese u šupljinu bronhoskopskog bronha. U tom slučaju sluznica se podmazuje anestezijom.

Tada se materijal isporučuje u laboratorij za proučavanje. Sjetva se provodi u skladu sa standardnom shemom, mikroskopom. Tada se izolira čista kultura, i dalje se provode manipulacije. Postavljen je antibiotik, koji omogućuje identificiranje spektra bakterijske osjetljivosti i odabir optimalne doze. 

Ako se sumnja na tuberkulozu, jutarnji se sluz ispituje tri dana. Kada se testirate za tuberkulozu, rezultat će biti spreman za 3-4 tjedna. Budući da mycobacterium tuberculosis, koji je uzročnik ove bolesti, raste vrlo sporo.

U pravilu bi se trebali naći predstavnici normalne mikroflore dišnih puteva. Također je potrebno uzeti u obzir da se sa smanjenim imunitetom parametri normalne mikroflore mogu razlikovati.

Analiza osjetljivosti spermija na antibiotike

To je bakteriološka studija ejakulacije sperme s daljnjim odabirom osjetljivih antibiotika i njihovih koncentracija. Najčešće se provodi u liječenju neplodnosti i drugih bolesti muškog reproduktivnog sustava. U slučaju da je bolest popraćena infektivnim procesom. Glavni uzrok muške neplodnosti je u većini slučajeva infekcija. U početku se obično izvodi spermogram. Prema rezultatima, određuje se gnojidbeni kapacitet sperme. Ako ova analiza pokazuje veliki broj bijelih krvnih stanica, možemo govoriti o upalnom procesu. Istovremeno, mikrobiološka analiza obično se propisuje odmah, budući da upala gotovo uvijek prati infekcija. Na temelju dobivenih rezultata odabire se odgovarajuća terapija. Studiju obično propisuje androlog.

Također, razlog za analizu je prostatitis, veneralne bolesti. Dodijeli i u slučaju da partner ima spolno prenosivu bolest.

Točna analiza temelji se prije svega na ispravnom odabiru biološkog materijala. Uzmite materijal u posebne posude s širokim grlom. Temperatura skladištenja treba odgovarati temperaturi ljudskog tijela. U tom se slučaju materijal može pohraniti ne više od sat vremena. U zamrznutom obliku može se pohraniti najviše jedan dan. Tijekom primanja antibiotika, sjetva je neophodna, to mijenja kliničku sliku. Obično se usjeva predaje prije početka terapije antibioticima. Ili prestanite uzimati lijek 2-3 dana prije testa.

Zatim je posijano na hranjivom mediju. Inkubiraj u termostatu 1-2 dana. Nakon što se izolira čista kultura, provodi se identifikacija, određuje se osjetljivost i vrsta i stopa rasta svake kolonije. Osjetljivost na antibiotike utvrđena je u slučaju otkrivanja patogenih mikroorganizama. U prosjeku, analiza se obavlja 5-7 dana.

[39], [40], [41], [42], [43],

Analiza osjetljivosti na gluten

Postoje mnogi testovi s kojima možete odrediti imunološku osjetljivost na različite tvari ili patogene. Prije toga, glavna metoda bila je provođenje testova na temelju reakcije aglutinacije antitijela i antigena. Danas se ta ispitivanja koriste manje i manje, jer je njihova osjetljivost znatno niža od mnogih modernih tehnika, na primjer, testova glutena. Najčešće u praksi pribjegavaju testu sline za gluten i analizu fekala.

Test osjetljivosti na gluten služi za dijagnosticiranje različitih poremećaja crijeva. Temelji se na reakciji imunološkog sustava. Ako se gluten dodaje stolici, reakcija se javlja ili je odsutna. Ovo se smatra lažno pozitivnim ili lažnim negativnim rezultatom. Pozitivno ukazuje na predispoziciju kolitisa, veliku vjerojatnost njegovog razvoja. Također potvrđuje celijakiju.

Gluten se također može analizirati pomoću sline kao biološkog materijala. Možete mjeriti količinu protutijela na gliadin. Pozitivan rezultat ukazuje na osjetljivost na gluten. To može ukazivati na veliku vjerojatnost dijabetesa. Ako je rezultat pozitivan u oba testa, možete potvrditi hipi ili celijakiju. 

[44], [45]

Analiza osjetljivosti klamidije na antibiotike

Analiza se provodi u liječenju infektivnih i upalnih bolesti urogenitalnog trakta, uz sumnju na klamidiju. Materijal za studiju je struganje od vaginalne sluznice - kod žena, razmaz od uretre - kod muškaraca. Ograda je izrađena u sobi za liječenje pomoću jednokratne opreme. Važno je promatrati sterilnost. Prije uzimanja materijala, trebali biste se suzdržati od intimnosti u roku od 1-2 dana prije početka studije. Ako žena ima menstruaciju, materijal se uzima 3 dana nakon njezinog potpunog raskida.

Materijal se isporučuje u laboratorij. Kompletna analiza uključuje preliminarnu mikrofotografiju. To omogućuje vizualno određivanje mikroflore morfološkim značajkama, kako bi se ispravno odabrali hranjivi mediji. Sadržaj sluzi, gnoja, čestica epitela, može izravno ili neizravno ukazivati na razvoj upalnog procesa ili degeneraciju malignih stanica.

Zatim se proizvodi primarni usjev. Kultura se inkubira nekoliko dana pod termostatom, a identificira se kulturom. Zatim se dobiva ponovnim taloženjem na selektivne hranjive tvari namijenjene uzgoju klamidije. Dobivene kolonije su identificirane korištenjem biokemijskih testova. Nakon određivanja osjetljivosti na antibiotike standardnim metodama. Izaberite najosjetljiviji antibiotik, njegovu koncentraciju. Za uzgoj klamidije potrebni su posebni mediji koji su posebno dizajnirani za ovu vrstu mikroorganizama koji sadrže sve potrebne tvari i čimbenike rasta.

Također je moguće provesti biološku studiju. Da biste to učinili, zarazite uzročno sredstvo štakora. U nekim laboratorijima se umjesto štakora koristi posebno uzgojena kultura tkiva. To je zbog činjenice da su klamidija unutarstanični paraziti, a za njihovo uzgoj potrebni su posebni uvjeti. Mikroorganizmi se zatim određuju PCR metodom. Da bi se odredila osjetljivost, transplantacija je napravljena na selektivni medij kulture za klamidiju, nakon nekoliko dana rezultati su zabilježeni. Na otpor ili osjetljivost je suditi po suzbijanje infekcije u stanicama.  

[46], [47], [48], [49], [50], [51], [52], [53], [54]

Koliko je provedeno ispitivanje osjetljivosti na antibiotike?

U prosjeku, analiza se obavlja u roku od 5-7 dana. Neki su testovi učinjeni duže. Na primjer, kada se dijagnosticira tuberkuloza, rezultati se trebaju očekivati od 3 tjedna do mjesec dana. Sve ovisi o stopi rasta mikroorganizama. Često se laboratorijsko osoblje mora nositi s slučajevima kada se pacijentima traži da brže rade analizu. I čak nude i "nadoplatu" za hitnost. Međutim, ovdje je potrebno razumjeti da ništa ne ovisi o aktivnostima laboratorija u ovom slučaju. I ovisi samo o tome koliko brzo mikroorganizam raste. Svaka vrsta ima vlastitu, strogo definiranu stopu rasta.

Uobičajena izvedba

Nema pokazatelja apsolutnog univerzalnog standarda za sve analize. Prvo, za svaki biotop, ti pokazatelji mogu se razlikovati. Drugo, oni su pojedinačni za svaki mikroorganizam. To jest, pokazatelji norme iste mikroorganizma, recimo, za grlo i crijeva razlikuju se. Dakle, ako stafilokok prevlada u grlu kao predstavnik normalne mikroflore, tada crijeva dominiraju E. Coli, bifido i laktobacili. Značajno različiti pokazatelji za isti mikroorganizam u različitim biotopima. Na primjer, candida može normalno biti sadržana u određenoj količini u urogenitalnoj mikroflori. U usnoj šupljini, oni se obično ne sadrže. Probijanje candida u usnu šupljinu može ukazivati na njihovo umjetno otklizavanje od prirodnog staništa.

Urin, krv, cerebrospinalna tekućina su biološki mediji koji bi trebali biti sterilni, tj. Ne smiju sadržavati nikakve mikroflore. Prisutnost mikroflore u tim tekućinama ukazuje na snažan upalni, infektivni proces i također ukazuje na rizik od bakteremije i sepsa.

Općenito, postoji približna klasifikacija. Jedinica mjerenja u mikrobiologiji je KOE / ml, to jest broj jedinica za stvaranje kolonija u 1 mililitra biološke tekućine. Stupanj sjetve određen je brojem CFE i varira u širokom rasponu od 10 ¹  do 10 ⁹. Prema tome, 10 ¹  - minimalni broj mikroorganizama, 10 ⁹  - ozbiljan stupanj infekcije. U isto vrijeme, raspon do 10 ³ se smatra normom , svi pokazatelji iznad ovog broja ukazuju na patološku reprodukciju bakterija.

Što se tiče osjetljivosti na antibiotike, svi mikroorganizmi su podijeljeni na stabilan, umjereno osjetljiv, osjetljiv. Često se taj rezultat izražava kao kvalitativna karakteristika s indikacijom MIG - minimalne inhibitorne doze antibiotika koji još uvijek inhibira rast mikroorganizma. Za svaku osobu, kao i za svaki mikroorganizam, ti pokazatelji su strogo individualni.

[55], [56], [57], [58]

Uređaj za analizu

Kada provodite bakteriološke studije, osobito s definicijom osjetljivosti na antibiotike, jedan aparat neće biti dovoljan. Potrebna je puna, sveobuhvatna oprema bakteriološkog laboratorija. Potrebno je pažljivo planirati i odabrati opremu koja će odgovarati svakoj fazi istraživanja. U fazi uzorkovanja biološkog materijala potrebni su sterilni instrumenti, kutije, bixevi, spremnici, komore za pohranu i transportna oprema za isporuku materijala u laboratorij.

Prije svega, u laboratoriju je potreban visokokvalitetni mikroskop za mikrofotografiju. Danas postoji velik broj mikroskopa koji imaju različita svojstva - od tradicionalnog svjetla do mikroskopa faznog kontrasta i atomske sile. Moderna oprema omogućuje vam skeniranje slike u trodimenzionalnom prostoru i gledati na visokoj uvećanju uz visoku točnost.

U fazi sadnje i inkubacije mikroorganizama mogu biti potrebni autoklavi, suhi spaljivači, desikatori, parne kupke i centrifuga. Bitan je termostat u kojem se odvija glavna inkubacija biološkog materijala.

U fazi identifikacije mikroorganizama i provođenja antibiotika, mogu biti potrebni mikromanipulatori, maseni spektrometri, spektrofotometri, kolorimetri za različite brojeve i procjene biokemijskih svojstava kultura.

Osim toga, suvremeni laboratoriji mogu biti opremljeni opremom visoke tehnologije koja obavlja sve gore navedene glavne faze istrage, do izračuna rezultata u automatskom načinu rada. Među takvim uređajima obuhvaćaju, na primjer, složeni uređaj bakteriološkog laboratorija koji se temelji na spektrometru mase vremena leta. Ova linija uređaja omogućuje podjelu cijelog laboratorija u tri zone. Prva zona je prljava, u kojoj je snimljena analiza, registracija. Druga zona je radna zona, u kojoj, zapravo, čine osnovne mikrobiološke studije. I treća zona - sterilizacija i autoklav, gdje se provodi priprema i upotreba radnog materijala.

Modeli omogućuju inkubaciju pod širokim rasponom temperatura i uvjeta. Ugrađeni analizator krvi i drugih bioloških uzoraka sadrži rezultate visoke točnosti i pouzdanosti. Paket sadrži elektronske vage, bidistillyatory, centrifuga, ormari sterilizacije autoklava, automatski vodenoj kupelji sredovarka s ugrađenom miješalicom, pH metrom, termometrom i mikroskopa.

Također se upotrebljava mikrobiološki analizator, u kojem se postavljaju ispitni uzorci, nutrientni mediji, setovi za ispitivanje za određivanje osjetljivosti. Aparat provodi potrebne studije i izdaje gotove zaključke.

Podizanje i spuštanje vrijednosti

Dekodiranje analize može obaviti samo liječnik. No, često su pacijenti, nakon što su dobili rezultate u svojim rukama, bili panici, primjećujući veliki broj neshvatljivih simbola i figura. Kako se ne bi izgubili, preporučljivo je imati barem opću ideju kako dešifrirati analizu osjetljivosti na antibiotike. Obično u rezultatima, prva stavka označava naziv mikroorganizma koji je uzročnik ove bolesti. Ime je latinski. Također, ovdje se može naznačiti predstavnik normalne mikroflore koji prevladava u tijelu, pa nemojte paničariti. Druga stavka označava stupanj sijanja, tj. Količinu mikroorganizma. Obično ovaj broj kreće se od 10 ¹  do 10 ⁹. Treća stavka ukazuje na oblik patogenosti, a četvrto - imena antibakterijskih lijekova na koje je taj mikroorganizam osjetljiv. Najbliža inhibitorska koncentracija na kojoj je potisnut rast mikroorganizma je sljedeći.

[59], [60], [61], [62], [63], [64]