Antibiotska otpornost mikroorganizama: metode za određivanje

Antibiotici - jedno od najvećih dostignuća medicinske znanosti, koja godišnje štedi živote desetaka i stotina tisuća ljudi. Međutim, kako mudrost kaže, stara žena također ima erudicije. Ono što je prethodno ubilo patogene mikroorganizme, danas ne funkcionira na način na koji se koristi. Dakle, što je razlog: jesu li antimikrobni lijekovi pogoršali ili zbog otpornosti na antibiotike?

Određivanje otpornosti na antibiotike

Antimikrobni lijekovi (APM), koji se nazivaju antibiotici, izvorno su stvoreni u borbi protiv bakterijske infekcije. Zbog činjenice da različite bolesti mogu uzrokovati ne samo jednu, već i nekoliko vrsta bakterija grupiranih zajedno, u početku je proveden razvoj lijekova koji djeluju protiv određene skupine zaraznih agensa.

Ali bakterije, iako najjednostavniji, ali aktivno razvijajuće organizme, na kraju stječu sve više i više novih svojstava. Instinkt samoodržanja i sposobnost prilagodbe različitim životnim uvjetima čine patogene mikroorganizme jače. Kao odgovor na prijetnju životu, počinju sami razvijati sposobnost da se odupru, naglašavajući tajnu koja slabi ili potpuno neutralizira učinak aktivne tvari antimikrobnih lijekova.

Ispada da jednom učinkoviti antibiotici jednostavno prestanu ispuniti svoju funkciju. U ovom slučaju, oni govore o razvoju otpornosti na lijek protiv droga. I ovdje nije bitno djelotvornost aktivne supstance AMP, ali u mehanizmima za poboljšanje patogenih mikroorganizama, kroz koje bakterije postaju neosjetljive na antibiotike dizajnirane za borbu protiv njih.

Dakle, otpornost na antibiotike nije ništa više od smanjenja osjetljivosti bakterija na antimikrobne lijekove koji su stvoreni da bi ih uništili. Iz tog razloga, čini se, ispravno odabranim postupcima pripreme ne daje očekivane rezultate.

[1], [2], [3], [4], [5], [6],

Problem rezistencije na antibiotike

Nedostatak antibiotske terapije, povezan s rezistencijom antibiotika, dovodi do činjenice da bolest i dalje napreduje i pretvara se u teži oblik, čije liječenje postaje još teže. Posebno su opasni slučajevi kada bakterijska infekcija utječe na vitalne organe: srce, pluća, mozak, bubrege, itd., Jer je u ovom slučaju kašnjenje smrti slično.

Druga opasnost je da neke bolesti s kroničnom antibiotskom terapijom mogu postati kronične. Osoba postaje nositelj poboljšanih mikroorganizama otpornih na antibiotike određene skupine. Sada je izvor infekcije, u borbi protiv kojih stare metode postaju besmislene.

Sve to gura farmaceutsku znanost na izum novih, učinkovitijih sredstava s drugim aktivnim tvarima. Ali proces se ponovo odvija razvijanjem antibiotske otpornosti na nove lijekove iz kategorije antimikrobnih sredstava.

Ako netko izgleda kao da misli da je problem rezistencije antibiotika došao nedavno, on je vrlo pogrešan. Ovaj je problem stara kao i svijet. Pa, možda ne toliko, a ipak je već 70-75 godina. Prema općeprihvaćenoj teoriji, pojavilo se zajedno s uvođenjem prvog antibiotika u medicinsku praksu negdje u 40-ima dvadesetog stoljeća.

Iako postoji koncept ranijeg pojavljivanja problema otpora mikroorganizama. Prije pojave antibiotika, ovaj problem nije bio posebno obrađen. Tako je prirodno da se bakterije, poput ostalih živih bića, nastoje prilagoditi nepovoljnim uvjetima okoline, to je učinio na svoj način.

Problem otpornosti patogenih bakterija se prisjetio kada su se pojavili prvi antibiotici. Međutim, pitanje nije bilo toliko važno. U to vrijeme, aktivno provode razvoj različitih skupina antibiotika, koji na neki način bio zbog nepovoljnih političkih prilika u svijetu, rata, kada su vojnici umrli od rana i sepse samo zato što ne mogu pružiti učinkovitu pomoć zbog nedostatka lijekova. Samo ti lijekovi još nisu postojali.

Najveći broj zbivanja proveden je u 50-60 godina dvadesetog stoljeća, a tijekom sljedeća dva desetljeća izvršeno je poboljšanje. Napredak na tome nije završio, ali od 80-ih godina, razvoj antibakterijskih sredstava postao je znatno manji. Kriv li do velikih troškova na poduzeća (razvoj i proizvodnju novih proizvoda u našem vremenu dolazi već do granice u SAD-u 800 milijuna dolara), ili jednostavno nedostatak novih ideja za „militantnim” aktivnim tvarima za inovativne lijekove, ali u vezi s problemom otpornosti na antibiotike izvan na novu zastrašujuću razinu.

Razvijajući obećavajuće AMP-ove i stvaranje novih skupina takvih lijekova, znanstvenici su se nadali da će pobijediti više vrsta bakterijskih infekcija. Ali sve se pokazalo da nije tako jednostavno "zahvaljujući" rezistenciji antibiotika, koja se vrlo brzo razvija u pojedinačnim sojevima bakterija. Entuzijazam se postupno suši, ali problem ostaje neriješen dugo vremena.

Ostaje nejasno kako mikroorganizmi mogu razviti otpornost na droge, što bi ih teoretski trebalo ubiti? Ovdje je nužno shvatiti da se "ubijanje" bakterija događa samo kada se lijek koristi za namjeravanu svrhu. A što zapravo imamo?

Uzroci rezistencije na antibiotike

Ovdje dolazimo do glavnog pitanja tko je kriv, da bakterije kada je izložen antibakterijskih sredstava ne umiru, i stvarno degenerik stjecanjem novih svojstava, što nije u rukama čovječanstva? Što izaziva takve promjene koje se javljaju s mikroorganizmima koji su uzrok mnogih bolesti s kojima se čovječanstvo bori više od desetljeća?

Jasno je da je istinski uzrok razvoja otpornosti na antibiotike sposobnost živih organizama da prežive u različitim uvjetima, prilagođavajući ih na različite načine. Ali sposobnost izbjegavanja smrtonosnog projektila u lice antibiotika, što bi ih u teoriji trebalo nositi sa smrću, bakterije ne. Pa kako se ispostavilo da oni ne samo da prežive, nego i poboljšavaju zajedno s poboljšanjem farmaceutskih tehnologija?

Treba shvatiti da ako postoji problem (u našem slučaju, razvoj rezistencije antibiotika u patogene mikroorganizme), onda postoje izazivači koji stvaraju uvjete za to. Upravo u ovom pitanju sada pokušavamo razumjeti.

[7], [8], [9], [10], [11],

Čimbenici razvoja otpornosti na antibiotike

Kada osoba dođe liječniku s pritužbama na zdravlje, očekuje stručnu pomoć stručnjaka. Ako je riječ o infekciji dišnog trakta ili drugim bakterijskim infekcijama, liječnikova zadaća je propisivanje učinkovitog antibiotika koji neće dopustiti razvoj bolesti i određivanje doze potrebne za tu svrhu.

Izbor lijekova kod liječnika je dovoljno velik, ali kako točno odrediti lijek koji stvarno pomaže u borbi s infekcijom? S jedne strane, kako bi opravdali imenovanje antimikrobnog lijeka, potrebno je prvo utvrditi vrstu patogena, prema etiotropskom konceptu odabira lijekova, koji se smatra najtočnijom. No, s druge strane, može potrajati i do 3 ili više dana, dok je najvažniji uvjet za uspješno liječenje smatra pravovremenom terapijom u ranim stadijima bolesti.

Liječnik ne može ništa učiniti, nakon što je dijagnoza postignuta, da bi slučajno djelovala u prvim danima, kako bi nekako usporavala bolest i spriječila je širenje na druge organe (empirijski pristup). Pri imenovanju ambulantnog liječenja liječnik proizlazi iz pretpostavke da određene bakterije mogu biti uzročnikom određene bolesti. To je razlog za početni odabir lijeka. Svrha može varirati ovisno o rezultatima analize patogena.

I dobro je ako je liječnički sastanak potvrđen rezultatima testova. Inače, ne samo da će vrijeme biti izgubljeno. Pitanje je da za uspješno liječenje postoji još jedan nužniji uvjet - potpunu deaktivaciju (u medicinskoj terminologiji postoji koncept "irradikacije") patogenih mikroorganizama. Ako se to ne dogodi, preživjeli mikrobi jednostavno "razboljeti", a oni će razviti neku vrstu imuniteta na aktivnu supstanciju antimikrobnog lijeka koji je prouzročio njihovu "bolest". To je jednako prirodno kao i proizvodnja protutijela u ljudskom tijelu.

Ispada da ako se antibiotik pogrešno ili neučinkovito pokrene režim doziranja i primanja, patogeni mikroorganizmi ne mogu propasti, već mijenjati ili stjecati prethodno neobične mogućnosti. Uzgojem, takve bakterije čine cijelu populaciju sojeva otpornih na antibiotike određene skupine, tj. Bakterije otporne na antibiotike.

Drugi čimbenik koji nepovoljno utječe na osjetljivost patogenih mikroorganizama na antibakterijske lijekove je uporaba AMP-a u stočarstvu i veterinarskoj medicini. Uporaba antibiotika u tim područjima nije uvijek opravdana. Osim toga, definicija bolesti u većini slučajeva, patogen se ne provodi ili obavlja kasno, jer antibiotici postupa u osnovi životinje u prilično teškom stanju, a radi se o vremenu i čekati rezultate ispitivanja nije moguće. A u selo, veterinar ne uvijek ima takvu priliku, pa se ponaša slijepo.

Ali to bi bilo ništa, samo postoji još jedan veliki problem - ljudski mentalitet, kada su svi liječnici sami. Štoviše, razvoj informacijske tehnologije i mogućnost kupnje većine antibiotika bez liječničkog recepta samo pogoršavaju ovaj problem. A ako uzmemo u obzir da imamo više nego nekvalificiranih samoučenih liječnika od onih koji strogo prate liječničke recepte i preporuke, problem dobiva globalnu dimenziju.

U našoj zemlji situacija pogoršava činjenica da većina ljudi i dalje financijski bankrotira. Nemaju priliku kupiti učinkovite, ali skupe lijekove nove generacije. U tom slučaju zamjenjuju imenovanje liječnika s jeftinijim starim analogama ili drogama, koje je savjetovao najbolji prijatelj ili savjesni prijatelj.

"To mi je pomoglo i pomoći će vam!" - možete li se raspravljati s tim ako riječi izaslane usnama susjeda koji je savladao bogato životno iskustvo, koji je prošao rat? I malo tko misli da su zahvaljujući takvim dobro čitljivim i vjerodostojnim, patogenim mikroorganizmima dugo prilagođeni za preživljavanje pod djelovanjem lijekova preporučenih u ranijim vremenima. A ono što je pomagalo djedu prije 50 godina, može se pokazati neučinkovitom u naše vrijeme.

A što možemo reći o reklamiranju i neobjašnjivoj želji nekih ljudi da isprobaju inovacije na sebi, čim se pojavi simptom prikladna bolest. I zašto svi ovi liječnici, ako postoje takvi prekrasni lijekovi, saznajemo od novina, TV ekrana i internetskih stranica. Tek je tekst o samozavaravanju već postao toliko dosadan da malo ljudi obratite pozornost na to sada. I jako uzaludan!

[12], [13], [14], [15], [16], [17], [18], [19], [20],

Mehanizmi rezistencije na antibiotike

Nedavno je otpornost na antibiotike postala brojni problem u farmakološkoj industriji koja razvija antimikrobne lijekove. Stvar je u tome što je inherentna gotovo svim poznatim vrstama bakterija, tako da antibiotska terapija postaje manje učinkovita. Takve zajedničke uzročnici kao što su Staphylococcus, Escherichia i Pseudomonas aeruginosa, Proteus imaju rezistentnih sojeva koji su raspoređeni po svojim precima izloženih na antibiotike.

Otpornost na različite skupine antibiotika, pa čak i na pojedinačne lijekove razvija se na različite načine. Dobra stara penicilina i tetraciklini, kao i novi razvoj u obliku cefalosporini i aminoglikozida karakterizira sporog razvoja otpornosti na antibiotike, paralelno s tim pada i njihov terapijski učinak. Što se može reći o takvim pripremama, od kojih je aktivni sastojak je streptomicin, eritromicin, a lmcomycm rimfampitsin. Otpornost na ove lijekove raste vrlo brzo, zbog čega je imenovanje potrebno mijenjati čak i tijekom liječenja, bez čekanja na njegov završetak. Isto vrijedi za pripravu oleandomicina i fusidina.

Sve to daje osnovu pretpostaviti da su mehanizmi razvoja otpornosti na antibiotike na različite lijekove značajno različiti. Pokušajmo shvatiti koja svojstva bakterija (prirodno ili stečeno) ne dopuštaju antibioticima da proizvode svoje ozračje, kao što je izvorno zamišljeno.

Za početak definirati činjenicu da su otporni na bakterije mogu biti prirodne (zaštitna funkcija, odobren je izvorno) i stekao, što smo raspravljali ranije. Do sada smo uglavnom se radi o istinskom otpornosti na antibiotike, povezane sa značajkama mikroorganizama, nego pogrešnog izbora ili imenovanja lijeka (u ovom slučaju govorimo o lažnom otpornosti na antibiotike).

Svako živo biće, uključujući i najjednostavnije, ima svoju jedinstvenu strukturu i neke osobine koje mu dopuštaju preživljavanje. Sve je to genetski određeno i prenosi se s generacije na generaciju. Prirodna otpornost na specifične aktivne tvari antibiotika također je određena genetski. U različitim vrstama bakterija otpornost je usmjerena na određenu vrstu lijekova, zbog čega je povezano razvoj različitih skupina antibiotika koji utječu na određenu vrstu bakterija.

Čimbenici koji uzrokuju prirodni otpor mogu biti različiti. Na primjer, struktura proteinske membrane mikroorganizma može biti takva da se antibiotik ne može nositi s njom. Ali antibiotici mogu utjecati samo molekula bjelančevina, uništavajući ga i uzrokujući smrt mikroorganizma. Razvoj djelotvornih antibiotika podrazumijeva uzimanje u obzir strukture bjelančevina bakterija protiv kojih se djelovanje lijeka usmjerava.

Na primjer, rezistencija antibiotika stafilokoka na aminoglikozide posljedica je činjenice da potonja ne može prodrijeti u mikrobnu membranu.

Cijela površina mikroba prekrivena je receptorima, pri čemu su određene vrste povezane s AMP. Mali broj prikladnih receptora ili njihova potpuna odsutnost dovode do činjenice da nema vezivanja, pa stoga nema antibakterijskog učinka.

Među ostalim receptorima su i one koje za antibiotik služe kao vrsta beacon signalizirajući mjesto bakterija. Odsutnost takvih receptora omogućuje mikroorganizmu skrivanje od opasnosti u obliku AMP-a, koji je neka vrsta prerušavanja.

Neki mikroorganizmi imaju prirodnu sposobnost aktivnog uklanjanja AMP-a iz stanice. Ta sposobnost se zove effluksom i karakterizira otpornost Pseudomonas aeruginosa protiv karbapenema.

Biokemijski mehanizam rezistencije na antibiotike

Pored prirodnih mehanizama razvoja otpornosti na antibiotike navedene gore, postoji još jedna koja se ne odnosi na strukturu bakterijske stanice već na funkcionalnost.

Činjenica da se u tijelu bakterija mogu proizvesti enzimi koji mogu imati negativan učinak na molekule aktivne tvari AMP i smanjiti njegovu učinkovitost. Bakterije u interakciji s takvim antibioticima također pate, njihov učinak je znatno oslabljen, što stvara pojavu liječenja infekcije. Ipak, pacijent ostaje nositelj bakterijske infekcije neko vrijeme nakon takozvanog "oporavka".

U ovom slučaju, mi se bavimo modifikacijom antibiotika, zbog čega postaje neaktivan u odnosu na ovu vrstu bakterija. Enzimi proizvedeni različitim vrstama bakterija mogu se razlikovati. Staphylococcus je karakteriziran sintezom beta-laktamaze, što izaziva rupturu laktnog prstena antibiotika serije penicilina. Razvoj acetiltransferaze može objasniti otpornost na gram-negativne bakterije kloramfenikola itd.

[21], [22], [23]

Stjecanje otpornosti na antibiotike

Bakterije, kao i ostali organizmi, nisu stranci evoluciji. Kao odgovor na „vojne” akcije protiv njih, mikroorganizmi mogu promijeniti svoju strukturu ili počinju sintetizirati broj enzimskog tvari koje ne samo da može smanjiti učinkovitost lijeka, ali i da ga u potpunosti uništi. Na primjer, aktivna proizvodnja alanin transferaze čini "cikloserin" neučinkovitom protiv bakterija koje ga proizvode u velikim količinama.

Otpornost na antibiotik može se razviti i zbog modifikacije stanične strukture proteina, koja je također njegov receptor, na koju se AMP treba vezati. Tj ove vrste proteina mogu biti odsutne u bakterijskom kromosomu ili mijenjati njezina svojstva, zbog čega povezivanje između bakterije i antibiotika postaje nemoguće. Na primjer, gubitak ili modifikacija proteina koji veže penicilin uzrokuje neosjetljivost na peniciline i cefalosporine.

Kao rezultat razvoja i aktiviranja zaštitnih funkcija u bakterijama koje su prethodno osjetljive na destruktivni učinak određenog tipa antibiotika, propusnost stanične membrane mijenja. To se može učiniti smanjenjem kanala kroz koje aktivne tvari AMP mogu prodrijeti u stanicu. To su ta svojstva zbog neosjetljivosti streptokoka u beta-laktam antibiotike.

Antibiotici mogu utjecati na stanični metabolizam bakterija. Kao odgovor, neki mikroorganizmi naučili su raditi bez kemijskih reakcija na koje utječe antibiotik, što je i zaseban mehanizam za razvoj rezistencije na antibiotike, što zahtijeva stalno praćenje.

Ponekad bakterije idu na određeni trik. Pristupanjem gustijoj tvari ujedinjeni su u zajednicama zvanim biofilmovi. Unutar zajednice, oni su manje osjetljivi na antibiotike i mogu sigurno tolerirati ubijanje doziranja za jednu bakteriju koja živi izvan "kolektivnog".

Druga mogućnost je kombinirati mikroorganizme u skupine na površini polutvrde medija. Čak i nakon diobe stanica, dio bakterijske "obitelji" ostaje unutar "grupiranja", na što antibiotici ne mogu utjecati.

[24], [25], [26], [27], [28], [29], [30]

Geni otpornosti na antibiotike

Postoje koncepti genetskog i ne-genetskog otpornosti na lijekove. S tim posljednjim, imamo posla kada uzmemo u obzir bakterije s neaktivnim metabolizmom, koji nisu podložni množenju u normalnim uvjetima. Takve bakterije mogu razviti otpornost na antibiotike na određene vrste lijekova, no ta sposobnost se ne prenosi na svoje potomke, jer nije genetski inkorporirana.

To je karakteristično za patogene mikroorganizme koji uzrokuju tuberkulozu. Osoba može zaraziti i ne sumnjati u bolest dugi niz godina, sve dok imunitet iz nekog razloga ne uspije. To je okidač za umnožavanje mikobakterija i progresiju bolesti. Ali svi isti lijekovi se koriste za liječenje tuberkuloze, bakterijski potomci i dalje ostaju osjetljivi na njih.

Isto vrijedi i za gubitak proteina u staničnoj stijenci mikroorganizama. Sjeti se, opet o bakterijama koje su osjetljive na penicilin. Penicilini inhibiraju sintezu proteina koji služi za izgradnju stanične membrane. Pod utjecajem AMP serije penicilina mikroorganizmi mogu izgubiti staničnu stijenku, čiji građevinski materijal je protein koji veže penicilin. Takve bakterije postaju otporne na peniciline i cefalosporine, koji sada nemaju što komunicirati. Taj je fenomen privremen, ne odnosi se na mutaciju gena i prijenos naslijeđenog gena nasljeđivanjem. S pojavom stanične stijenke, koja je karakteristična za prijašnje populacije, otpor antibiotika u takvim bakterijama nestaje.

Rečeno je da se genetska rezistencija na antibiotike događa kada se promjene u stanicama i metabolizam unutar njih javljaju na razini gena. Mutacije gena mogu uzrokovati promjene u strukturi stanične membrane, izazvati proizvodnju enzima koji štite bakterije od antibiotika, a također mijenjaju broj i svojstva receptora bakterijske stanice.

Postoje dva načina razvoja događaja: kromosomskih i ekstrakromosomskih. Ako se mutacija gena javlja na dijelu kromosoma koji je odgovoran za osjetljivost na antibiotike, govori o otpornosti na kromosomske antibiotike. Sam po sebi, takva mutacija dolazi vrlo rijetko, obično uzrokuje učinke lijekova, ali opet, ne uvijek. Vrlo je teško kontrolirati ovaj proces.

Kromosomske mutacije mogu se prenositi s generacije na generaciju, postupno oblikujući određene vrste (sorti) bakterija otpornih na jedan ili drugi antibiotik.

Krivci ekstraomromosomske rezistencije na antibiotike su genetički elementi koji postoje izvan kromosoma i nazivaju se plazmidima. Ovi elementi sadrže gene odgovorne za proizvodnju enzima i permeabilnost bakterijskog zida.

Otpornost na antibiotike najčešće je rezultat horizontalnog prijenosa gena, kada neke bakterije prenose neke geni drugima koji nisu njihovi potomci. Ali ponekad nepovezane točke mutacija mogu se promatrati u genomu patogena (veličina 1 u 108 za jedan postupak kopiranja DNA majke stanice, koja se opaža kod repliciranja kromosoma).

Tako su u jesen 2015. Godine znanstvenici iz Kine opisali gen MCR-1, koji se nalazi u svinjskim mesu i svinjskim svinjama. Značaj ovog gena je mogućnost njegovog prijenosa na druge organizme. Nakon nekog vremena, isti gen pronađen je ne samo u Kini, već iu drugim zemljama (SAD, Engleska, Malezija, europske zemlje).

Geni za rezistenciju na antibiotike mogu potaknuti proizvodnju enzima koji nisu prethodno bili proizvedeni u tijelu bakterija. Na primjer, enzim NDM-1 (metal beta-laktamaza 1), pronađen u bakterijama Klebsiella pneumoniae u 2008. Godini. U početku je pronađeno u bakterijama iz Indije. No, u sljedećim godinama, enzim koji osigurava otpornost na antibiotike protiv većine AMP otkriven je u mikroorganizmima u drugim zemljama (Velika Britanija, Pakistan, SAD, Japan, Kanada).

Patogeni mikroorganizmi mogu biti otporni na određene lijekove ili skupine antibiotika, kao i na različite skupine lijekova. Postoji takva stvar poput otpora antibiotika, kada mikroorganizmi postaju neosjetljivi na lijekove slične kemijske strukture ili mehanizma djelovanja na bakterijama.

Otpornost stabiokoka na antibiotike

Stafilokokna infekcija smatra se jednim od najčešćih među infekcijama stečenim u zajednici. Međutim, čak iu bolnici na površinama različitih objekata, moguće je otkriti oko 45 različitih sojeva stafilokokusa. To sugerira da je borba protiv ove infekcije gotovo prvi prioritet zdravstvenih radnika.

Problem ovog zadatka je da je većina sojeva većine patogenih stafilokokom Staphylococcus epidermidis i Staphylococcus aureus otporne na mnoge vrste antibiotika. I broj takvih sojeva raste svake godine.

Sposobnost stafilokoka za višestruke genetske mutacije, ovisno o stanišnim uvjetima, čini ih gotovo neranjivima. Mutacije se prenose potomcima, au kratkom vremenu postoje cijele generacije infektivnih sredstava otpornih na antimikrobne preparate iz roda Staphylococci.

Najveći problem - to je meticilin-rezistentni sojevi koji su otporni, ne samo da beta-laktame (β-laktamski antibiotici: pojedine skupine penicilina, cefalosporina, karbapenema i Monobaktami), ali i druge vrste Ila: tetraciklina, makrolida, linkozamidne aminoglikozide, fluorokinolona, kloramfenikol.

Dugo vremena, infekcija se može uništiti samo uz pomoć glikopeptida. Trenutno, problem otpornosti na antibiotike sojeva Staphylococcus postiže nove vrste AMP - oksazohdinona, koji je istaknuti predstavnik linezolid.

[31], [32], [33], [34], [35], [36], [37], [38]

Metode za određivanje otpornosti na antibiotike

Prilikom stvaranja novih antibakterijskih lijekova, vrlo je važno jasno definirati njegova svojstva: kako rade i što su učinkovite bakterije. To se može odrediti samo laboratorijskim istraživanjem.

Analiza rezistencije na antibiotike može se provesti korištenjem različitih metoda, od kojih su najpopularniji:

• Metoda diska, ili difuziju AMP u agaru prema Kirby-Bayer
• Metoda serijskih razrjeđenja
• Genetska identifikacija mutacija koje uzrokuju rezistenciju na lijek.

Prva metoda do danas smatra se najčešćim zbog jeftinosti i jednostavnosti izvršenja. Bit metode diskova je da se sojevi bakterija izoliranih kao rezultat istraživanja nalaze u hranjivom mediju dovoljne gustoće i prekriveni impregniranom otopinom AMP s papirnatim diskovima. Koncentracija antibiotika na diskovima je drugačija, pa kad se lijek raspršuje u bakterijski medij, može se promatrati gradijent koncentracije. Prema veličini zone ne-rasta mikroorganizama, može se ocijeniti aktivnost pripravka i izračunati učinkovitu dozu.

Varijanta metode diska je E-test. U tom slučaju, umjesto diskova, koriste se polimerne ploče na kojima se primjenjuje određena koncentracija antibiotika.

Nedostaci tih metoda su netočnost izračuna povezanih s ovisnošću gradijenta koncentracije na različite uvjete (gustoća medija, temperature, kiselosti, sadržaja kalcija i magnezija, itd.).

Postupak serijskih razrjeđivanja temelji se na stvaranju nekoliko varijanti tekućeg ili gustog medija koji sadrži različite koncentracije testne priprave. Svaka od varijanti popunjena je određenom količinom bakterijskog materijala koji se proučava. Na kraju razdoblja inkubacije, procjenjuje se rast bakterija ili njegova odsutnost. Ova metoda omogućuje određivanje minimalne učinkovite doze lijeka.

Metoda se može pojednostaviti uzimanjem uzorka samo 2 medija, čija će koncentracija biti što je moguće bliža potrebnom za inaktivaciju bakterija.

Metoda serijskog razrjedivanja s pravom se smatra zlatnim standardom za određivanje otpornosti na antibiotike. No, zbog visokih troškova i složenosti, nije uvijek primjenjivo u domaćoj farmakologiji.

Postupke za identifikaciju mutacija dati informacije o prisutnosti određene vrste bakterija mutiranih gena koji pridonose razvoju rezistencije na određene lijekove, a time i situacije izlaze sistematizirati temelju sličnosti fenotipske manifestacije.

Ova metoda razlikuje se od visokih troškova ispitnih sustava za njegovu primjenu, no njegova je vrijednost za predviđanje genetske mutacije u bakterijama neporeciva.

Bez obzira koliko su učinkovite gornje metode ispitivanja otpornosti na antibiotike, one ne mogu u potpunosti odražavati sliku koja se odvija u živom tijelu. Ako uzmemo u obzir trenutak kada je organizam svake osobe individualan, procesi distribucije i metabolizma lijekova mogu se odvijati drugačije u njemu, eksperimentalna slika je daleko od stvarnog.

Načini nadilaženja rezistencije na antibiotike

Bez obzira koliko je dobar ovaj ili onaj lijek, ali s odnosom prema liječenju koje imamo, ne možemo isključiti činjenicu da se u nekom trenutku može promijeniti osjetljivost patogenih mikroorganizama. Stvaranje novih lijekova s istim aktivnim tvarima također ne rješava problem rezistencije na antibiotike. A novim naraštajima lijekova osjetljivost mikroorganizama s čestim neopravdanim ili neispravnim imenima postepeno slabi.

Napredak u tom pogledu smatra se izumom kombiniranih pripravaka koji se zovu zaštićeni. Njihova uporaba je opravdana za bakterije koje proizvode destruktivne enzime za zajedničke antibiotike. Zaštitna popularne antibiotika od strane uključivanjem novog lijeka specijalnih sredstava (npr inhibitore enzima, opasnim za određeni tip IIa) su izrezane proizvodnja tih enzima sprječava bakterije i uklanjanje lijeka iz stanice preko membranske pumpe.

Kao inhibitori beta-laktamaza, uobičajeno je koristiti klavulansku kiselinu ili sulbaktam. Oni se dodaju u beta-laktam antibiotike, što povećava učinkovitost potonjeg.

Trenutno je razvoj lijekova koji mogu utjecati ne samo na pojedine bakterije, već i na one koji su se spojili u skupine. Borba protiv bakterija u biofilmu može se provesti samo nakon uništenja i oslobađanja organizama prethodno povezanih kemijskim signalima. U pogledu mogućnosti uništavanja biofilmova, znanstvenici razmatraju takav oblik lijekova kao bakteriofagi.

Borba protiv drugih bakterijskih "skupina" provodi se prenošenjem u tekući medij, gdje mikroorganizmi počinju zasebno postojati, a sada se mogu boriti protiv konvencionalnih lijekova.

Suočeni s pojavom otpora u procesu liječenja lijekovima, liječnici rješavaju problem propisivanja različitih lijekova učinkovitih protiv izoliranih bakterija, ali s različitim mehanizmima djelovanja na patogenoj mikroflori. Na primjer, istodobno se koriste lijekovi s baktericidnim i bakteriostatskim djelovanjem ili zamjenjuju jedan lijek s drugom, iz druge grupe.

Sprječavanje rezistencije na antibiotike

Glavni cilj antibiotske terapije je potpuno uništenje populacije patogenih bakterija u tijelu. Ovaj zadatak može se riješiti samo imenovanjem učinkovitih antimikrobnih sredstava.

Efikasnost se određuje prema spektar aktivnosti (bilo da su uključeni u tom području identificirane patogenom) mogućnosti da se prevlada mehanizama otpornosti na antibiotike, optimalno izabrane režim doziranja u kojem se uništavanje patogenih mikroflore. Osim toga, pri propisivanju lijeka treba razmotriti vjerojatnost razvoja nuspojava i dostupnost liječenja svakog pojedinog bolesnika.

Uz empirijski pristup terapiji bakterijskih infekcija, nije moguće uzeti u obzir sve ove točke. To zahtijeva visoku profesionalnost liječnika i stalno praćenje informacija o infekcijama i učinkovitih lijekova za borbu protiv njih, tako da imenovanje nije bilo neopravdano i nije dovelo do razvoja otpornosti na antibiotike.

Stvaranje visoko tehnoloških medicinskih centara omogućava prakticiranje etiotropnog tretmana kada se patogen primi u kraćem vremenu, a zatim se primjenjuje djelotvoran lijek.

Prevencija otpornosti na antibiotik također se može smatrati kontrolom propisivanja. Na primjer, u ARVI, imenovanje antibiotika nije opravdano, ali pridonosi razvoju rezistencije na antibiotike mikroorganizama koji su za sada u "spavanju" stanju. Činjenica da antibiotici mogu izazvati slabljenje imuniteta, što će zauzvrat uzrokovati reprodukciju bakterijske infekcije koja je zakopana unutar tijela ili je izvana izvana.

Vrlo je važno da propisani lijekovi zadovoljavaju cilj koji treba postići. Čak i lijek propisan za profilaktičke svrhe trebao bi imati sve svojstva potrebna da uništi patogene mikroflore. Izbor nasumičnog lijeka ne samo da može dati očekivani učinak nego i pogoršati situaciju razvijanjem otpornosti na pripremu određene vrste bakterija.

Posebna pozornost treba posvetiti doziranju. Male doze, neučinkovite u borbi protiv infekcije, opet dovode do formiranja rezistencije antibiotika na patogene. No, nema potrebe za pretjeravanjem, jer je antibiotska terapija velika vjerojatnost razvoja toksičnih učinaka i anafilaktičkih reakcija opasnih za život pacijenta. Pogotovo ako se liječenje provodi na izvanbolničkoj osnovi bez kontrole medicinskog osoblja.

Kroz medije potrebno je prenijeti ljudima opasnost od samozavaravanja s antibioticima, kao i nedovršen tretman, kada bakterije ne umiru, već postaju manje aktivne s razvijenim mehanizmom otpornosti na antibiotike. Isti učinak također osiguravaju jeftini, nedopušteni lijekovi koje ilegalne farmaceutske tvrtke smještaju u proračunski kolegij već postojećih lijekova.

Vrlo učinkovita mjera za sprječavanje otpornosti na antibiotik je kontinuirano praćenje postojećih infektivnih sredstava i razvoj otpornosti na antibiotike u njima ne samo na razini regije ili regije već i na nacionalnoj razini (pa čak i cijelom svijetu). Jao, to samo treba sanjati.

U Ukrajini, sustav kontrole infekcije kao takav ne postoji. Određene su odredbe, od kojih je jedna (još u 2007. Godini!), Što se tiče obstetrijskih bolnica, uključuje uvođenje različitih metoda praćenja nosačkih infekcija. Ali sve se opet počiva na financiranju, a na terenu se takve studije uglavnom ne provode, a da ne spominjemo liječnike iz drugih grana medicine.

U Ruskoj Federaciji na problem otpornosti na antibiotike tretira s više odgovornosti, a dokaz za to je projekt „Karta antimikrobne rezistencije Rusije.” Istraživanja u ovom području, prikupljanje informacija i njegova sistematizacija sadržaja mapa na antibiotike koji su uključeni takve velike organizacije kao što Research Institute antimikrobne kemoterapije, međuregionalne Udruge za mikrobiologiju i antimikrobne kemoterapije, kao i znanstvenih i metodički otpornosti na antibiotike monitoring centar postavljen na inicijativu Federalne agencije za zdravstvo i društvenog razvoja.

Informacije koje se pružaju u okviru projekta stalno se ažuriraju i dostupne su svim korisnicima koji trebaju informacije o rezistenciji antibiotika i učinkovitom liječenju zaraznih bolesti.

Razumijevanje kako je postupno postupno pitanje smanjenja osjetljivosti patogenih mikroorganizama i pronalaženja rješenja za taj problem. No, ovo je već prvi korak na putu učinkovite borbe protiv problema koji se zove "otpornost na antibiotike". I ovaj je korak iznimno važan.