Analiza stolice na protozoe

Detekcija i diferencijacija protozoa u analizi stolice (razlikovanje patogenih oblika od nepatogenih) prilično je složen zadatak. Većina jednostaničnih organizama u stolici nalazi se u dva oblika: vegetativnom (stadij trofozoita) - aktivnom, pokretnom, vitalnom, lako podložnom štetnim učincima (posebno hlađenju) i stoga brzo umirućem nakon izlučivanja iz crijeva, te u obliku cista (oocista) otpornih na vanjske utjecaje. U formiranoj stolici protozoe se obično nalaze samo u encistiranom stanju; za otkrivanje vegetativnih oblika potrebno je pregledati stolicu dok je još topla. To je zbog činjenice da u ohlađenoj stolici vegetativni oblici protozoa brzo umiru i, dok su mrtvi, brzo podliježu djelovanju proteolitičkih enzima, zbog čega gube karakteristične značajke svoje strukture. Osim toga, pri hlađenju se smanjuje, a zatim nestaje pokretljivost protozoa - važan pomoćni faktor u njihovoj diferencijaciji.

[ 1 ], [ 2 ], [ 3 ], [ 4 ], [ 5 ]

Vrste parazita u izmetu

Glavne vrste parazita i najbolje metode za njihovo otkrivanje

Vrsta parazita	Često zahvaćeni organi	Dijagnostička metoda
Leishmania donovani	Slezena, jetra, limfni čvorovi	Detekcija parazita u punktima slezene, jetre, koštane srži, zahvaćene kože, detekcija specifičnih antitijela u krvi
Trypanosoma rhodesiense i T. gambiense	Limfni čvorovi i mozak	Detekcija parazita u zahvaćenoj koži, limfnim čvorovima, cerebrospinalnoj tekućini
Echinococcus granulosus ili Echinococcus multilocularis	Jetra, pluća, mozak	Detekcija specifičnih antitijela u krvi
Schistosoma haematobium, S. mansoni, S. japonicum itd.	Mokraćni trakt, jetra, portalna vena	Detekcija jaja parazita u urinu, stolici, rektalnoj biopsiji, tkivu jetre ili specifičnim antitijelima u krvi
Fasciola hepatica	Jetra	Detekcija jaja parazita u izmetu ili specifičnih antitijela u krvi
Clonorchis sinensis, Opisthorchis felineus, Opisthorchis viverrini	Bilijarni sustav	Detekcija jaja parazita u izmetu ili žuči
Trichostrongylus capricola, T. vitrinus	Tanko crijevo	Detekcija jaja parazita u izmetu
Echinostoma ilocanum	Tanko crijevo	Detekcija jaja parazita u izmetu
Angiostrongylus costaricensis	Tanko i debelo crijevo	Otkrivanje jaja U biopsiji crijeva
Dipylidum caninum	Tanko i debelo crijevo	Detekcija jaja parazita ili progutane stolice

U stolici se može otkriti 20 vrsta protozoa (8 patogenih i oportunističkih te 12 komenzalnih bakterija). Crijevne protozoe žive u tankom ili debelom crijevu u stadiju trofozoita i/ili ciste. Pripadaju jednoj od 4 skupine: amebe, flagelati, cilijati i kokcidije.

Dizenterična ameba u stolici

Entamoeba histolytica (dizenterijska ameba) uzrokuje amebijazu kod ljudi. Lokalizirana je u debelom crijevu i izlučuje se u obliku trofozoita (s tekućim izmetom) i/ili cista (u formiranoj stolici). Budući da većina vrsta ameba (crijevne, Hartmannove, Bütschlijeve) nisu patogene za ljude, potreban je veliki oprez pri procjeni rezultata pregleda izmeta. Samo otkrivanje hematofagnih trofozoita (tkivni oblik E. histolytica forma magna) može poslužiti kao pouzdan znak amebne dizenterije i/ili amebnog ulceroznog kolitisa kod pacijenta. Prisutnost eritrocita u protoplazmi ameba vrlo je važan dijagnostički znak, budući da ih nepatogeni oblici ameba nikada ne sadrže. U svim ostalim slučajevima, otkrivanje oblika trofozoita sličnih E. histolytici koji ne sadrže eritrocite nije osnova za dijagnosticiranje amebijaze kao bolesti. Rezultati detekcije samo cista E. histolytica (luminalni oblik), koje se mogu otkriti kod osoba koje se oporavljaju od akutne amebijaze, kod onih koji pate od kroničnog oblika amebijaze i kod nositelja, procjenjuju se na sličan način.

[ 6 ], [ 7 ], [ 8 ], [ 9 ]

Giardia u stolici

Lamblia intestinalis (Giardia) pripada klasi flagelata. Giardia parazitiraju u tankom crijevu, uglavnom u dvanaesniku, a također i u žučnom mjehuru. Postojanje trofozoita (vegetativnog oblika Giardia) zahtijeva tekuću okolinu, stoga se Giardia prilikom ulaska u debelo crijevo cistira, a u stolici se nalaze samo ciste. Samo kod obilnog proljeva ili nakon djelovanja laksativa mogu se u stolici otkriti vegetativni oblici.

Balantidije u stolici

Balantidium coli je jedini cilijarni parazit u ljudskom crijevu koji uzrokuje bolesti različite težine, od blagog kolitisa do teških ulcerativnih lezija. Patogen se nalazi u izmetu u obliku trofozoita ili cista. Prijenos je moguć kod zdravih osoba.

[ 10 ], [ 11 ], [ 12 ]

Kriptosporidija u stolici

Predstavnici roda Cryptosporidium trenutno se smatraju najvažnijim uzročnicima proljeva. Cryptosporidium (od grčkog "skrivena spora") su obligatni paraziti koji utječu na mikrovile sluznice gastrointestinalnog trakta i dišnih putova ljudi i životinja. Gastrointestinalne infekcije uzrokovane kriptosporidijama registrirane su u svim zemljama svijeta. Takva široka rasprostranjenost kriptosporidioze povezana je s velikim brojem prirodnih rezervoara infekcije, niskom zaraznom dozom i visokom otpornošću patogena na dezinficijense i antiparazitske lijekove.

Među kriptosporidijama, vrste potencijalno patogene za ljude su Cryptosporidium parvum i Cryptosporidium felis (identificirane kod HIV-om zaraženih osoba). Najtipičnija lokalizacija infekcije kod ljudi su distalni dijelovi tankog crijeva. Kod pacijenata s teškim imunodeficijencijama može biti zaražen cijeli gastrointestinalni trakt - od orofarinksa do sluznice rektuma.

Dijagnoza kriptosporidioze u većini slučajeva temelji se na detekciji oocista kriptosporidija u stolici i/ili (mnogo rjeđe) u biopsiji sluznice tankog crijeva u slučajevima sindroma vodenastog proljeva. Koristi se mikroskopija pripremljenih preparata obojenih po Gramu. U većini slučajeva ova metoda bojenja ne omogućuje detekciju oocista zbog njihove slabe sposobnosti zadržavanja boje i nemogućnosti razlikovanja od gljivica sličnih kvascima. Stoga se koristi bojenje otporno na kiseline. Ovom metodom bojenja, oociste kriptosporidija obojene su crveno ili ružičasto i jasno su vidljive na plavo-ljubičastoj pozadini na kojoj su obojeni drugi mikroorganizmi i crijevni sadržaj.

Kod akutne kriptosporidioze, broj oocista u stolici je visok, što ih čini lakim za otkrivanje mikroskopijom obojenih preparata. Međutim, kod kronične kriptosporidioze s blagim tijekom, kada je broj oocista u stolici malen, moraju se koristiti metode obogaćivanja kako bi se povećala vjerojatnost njihovog otkrivanja. Posljednjih godina serološke metode postale su uobičajene za dijagnozu kriptosporidioze.

Kriptosporidioza bilijarnog trakta može se manifestirati kao kolecistitis, mnogo rjeđe kao hepatitis (s porastom koncentracije bilirubina, AST-a, ALT-a, aktivnosti alkalne fosfataze u krvi) i sklerozirajući kolangitis. Za dijagnosticiranje bilijarne kriptosporidioze pregledavaju se biopsije jetre i žuči, gdje se kriptosporidije mogu otkriti u različitim fazama razvoja.

Za praćenje učinkovitosti liječenja protozojskih crijevnih lezija, izmet se pregledava ovisno o utvrđenoj bolesti: u slučaju amebijaze, balantidijaze - odmah nakon liječenja, u slučaju giardijaze - nakon 1 tjedna. Nakon liječenja invazija žučnih putova, učinkovitost se može pratiti i pregledom izmeta i žuči.

[ 13 ], [ 14 ]

Struganje s perianalnih nabora za enterobijazu

Struganje perianalnog nabora za enterobijazu je ciljani test za otkrivanje jajašaca glista (Enterobius vermicularis). Budući da zrele ženke glista ispuze van kako bi položile jajašca u naborima oko anusa, jajašca glista se rijetko nalaze u stolici; lakše ih je otkriti u struganju s nabora oko anusa ili u rektalnoj sluzi.