Testovi za humani papiloma virus: kako proći, dešifrirati

Humani papiloma virus predstavlja ozbiljnu prijetnju. Dijagnostika je neophodna kako bi se utvrdio soj infekcije i rizik od njezine onkogenosti. Takve informacije nam omogućuju stvaranje najprikladnijeg i najučinkovitijeg plana liječenja.

Visokokvalitetnu dijagnostiku provodi nekoliko stručnjaka istovremeno. Glavne indikacije za pregled tijela su:

• Aktivan seksualni život i česta promjena seksualnih partnera.
• Svrbež, peckanje u genitalnom području, atipičan iscjedak.
• Pojava novih izraslina na koži i sluznicama u obliku papiloma, bradavica i kondiloma.

Dijagnoza papiloma virusa sastoji se od skupa laboratorijskih i instrumentalnih metoda:

• Vizualni pregled i prikupljanje anamneze – liječnik pregledava zahvaćena područja i pita kada se prvi put pojavio osip ili drugi znakovi HPV-a. Procjenjuje vrstu i oblik neoplazmi. Ako postoje anogenitalne izrasline, provodi se pregled vrata maternice i uretroskopija.
• Citologija razmaza i struganja – provodi se kako bi se utvrdile morfološke promjene na staničnoj razini povezane s HPV-om. Točnost ove metode ovisi o tehnici prikupljanja materijala i kvalifikacijama laboratorijskih tehničara.
• Kolposkopija je pregled sluznice radi otkrivanja subkliničkih oblika infekcije. Dijagnoza se potvrđuje prisutnošću sljedećih čimbenika: leukoplakija, mozaik, punkcija, zona abnormalnih transformacija.
• Biopsija je uzimanje male količine zahvaćenog tkiva za mikroskopski pregled. Obično se izvodi kada postoji sumnja na zahvaćenost cerviksa.
• Histološki pregled – materijal dobiven biopsijom šalje se na laboratorijsko ispitivanje kako bi se identificirala prekancerozna stanja i druge stanične abnormalnosti.
• PCR – provodi se za identifikaciju pojedinačnih tipova HPV-a. Za dijagnostiku se koriste krv, urin, sluz i druge tkivne tekućine.
• Digene test je jedna od najpouzdanijih dijagnostičkih metoda. Ima visoku osjetljivost na humani papiloma virus. Omogućuje određivanje genotipa i njegove pripadnosti visokoonkogenoj ili niskoonkogenoj skupini.

Danas postoje mnoge metode koje vam omogućuju otkrivanje HPV infekcije i određivanje stupnja njezine agresivnosti.

Probir na humani papiloma virus

Obavezni test za pacijente s predispozicijom za maligne procese u tijelu je probir. Humani papiloma virus također je razlog za podvrgavanje ovom laboratorijskom testu.

Prvi probir preporučuje se ženama u dobi od 30 godina. Analiza je potrebna za otkrivanje ne samo papiloma virusa, već i za sprječavanje erozivnih lezija vrata maternice povezanih s HPV-om.

Najčešće se pacijentima propisuju sljedeće vrste pregleda:

• Citološki PAP test – za istraživanje se koristi strugotina cerviksa smještena u tekući medij. Pomaže u identificiranju onkoloških sojeva HPV-a u ranoj fazi razvoja.
• Prošireno – identificira genotipove s visokom onkogenošću i njihovu koncentraciju u tijelu.
• Lančana reakcija polimeraze ima visoku dijagnostičku vrijednost, jer omogućuje identifikaciju svih vrsta humanog papiloma virusa.

HPV probir se provodi i tijekom dijagnoze bolesti i tijekom terapije te za procjenu rezultata liječenja.

Test na humani papiloma virus

Ako se sumnja na papilomavirus, svim pacijentima se propisuje skup dijagnostičkih postupaka. HPV analiza je određivanje vrste virusa u laboratorijskim uvjetima. Za studiju se koriste različite biološke tekućine i tkiva.

Najčešće se za analizu uzima bris s genitalija. Uzimanje materijala s ovog područja potrebno je čak i u odsutnosti vizualnih simptoma papilomatoze. Dobivena biopsija se pregledava pod mikroskopom na epitelne stanice promijenjene virusom. Na temelju dijagnostičkih rezultata određuje se vrsta infekcije i rizik od njezine onkogenosti.

Prilikom planiranja trudnoće obavezno je napraviti test na papilomatozne infekcije kako bi se utvrdili uzroci neplodnosti i patologije gestacije. U tom slučaju, test se propisuje za oba partnera odjednom. To je zbog činjenice da se virus prenosi tijekom intimnog kontakta. Na temelju rezultata studije, liječnik može propisati dodatne dijagnostičke metode i izraditi plan liječenja.

[ 1 ], [ 2 ], [ 3 ], [ 4 ], [ 5 ], [ 6 ], [ 7 ], [ 8 ], [ 9 ], [ 10 ], [ 11 ]

Kvantitativna analiza za humani papiloma virus

Za otkrivanje papiloma virusa, određivanje njegove vrste i stupnja aktivnosti provodi se kvantitativna analiza. Postoji nekoliko metoda za određivanje HPV-a, razmotrimo ih:

1. Lančana reakcija polimeraze – PCR je standard za dijagnostiku HPV-a. Analiza se temelji na povećanju broja kopija virusne DNA u biopsiji. Ova metoda omogućuje detekciju čak i pojedinačnih tipova virusa s visokom točnošću.
2. Digene test – osobitost ove metode je pouzdano otkrivanje genotipova s povećanom onkogenošću. Za analizu se koriste različite biološke tekućine i materijali.
3. Određivanje prisutnosti virusnih antitijela - analiza otkriva specifične proteine imunološkog sustava. Svaki virusni agens koji uđe u tijelo potiče proizvodnju jedinstvenih imunoglobulina. Ako se u krvnom serumu otkriju antitijela na humani papiloma virus, to ukazuje na infekciju tijela.

Za provođenje kvantitativne analize koriste se kapilarna krv (iz prsta), strugotine s kože i sluznica te biopsije tkiva. 12 sati prije uzimanja testova treba prestati uzimati antifungalne, antivirusne, antimikrobne i druge lijekove, uključujući kontracepcijske lijekove. Na dan dijagnoze potrebno je tuširati se i temeljito oprati intimna područja ako se s njih uzimaju strugotine. Također, 2-3 dana prije postupka treba se suzdržati od spolnog odnosa.

Liječnik tumači dobivene rezultate. Liječnik uzima u obzir ne samo podatke provedene dijagnostike, već i kliničke manifestacije bolesti. U suprotnom, rezultati se mogu pogrešno protumačiti.

DNK humanog papiloma virusa, PCR

Jedna od najčešćih i najpouzdanijih metoda za otkrivanje DNA humanog papiloma virusa je PCR. Za provođenje lančane reakcije polimeraze koriste se različiti biološki materijali: krv, urin, razmazi s sluznice, amnionska tekućina. Analiza vam omogućuje da utvrdite prisutnost infekcije čak i ako je latentna u tijelu.

Princip ove dijagnostičke metode temelji se na izolaciji ljudske i virusne DNA. Bilo koja deoksiribonukleinska kiselina sastoji se od četiri nukleotida:

• A – adenin.
• T – timidin.
• G – gvanin.
• C – citozin.

Prema pravilima genetike, imaju određeni redoslijed kombiniranja: A+T, G+C. Svi živi organizmi imaju vlastitu DNK, koja se može izolirati. PCR prepoznaje fragmente patogene DNK, čime se izolira patogen.

Prednosti PCR-a:

1. Univerzalnost – osim humanog papiloma virusa, tijekom studije mogu se otkriti mnogi drugi uzročnici zaraznih bolesti.
2. Visoka osjetljivost – osim što određuje prisutnost virusa, metoda određuje njegov tip i druge karakteristike.
3. Učinkovitost – pouzdano identificira potrebnu infekciju.
4. Rezultati testa brzine mogu se dobiti unutar 24 sata od polaganja testa.

Priprema za analizu:

• Trebali biste prestati uzimati kontracepcijske pilule tjedan dana prije zakazanog testa, jer mogu utjecati na rezultate.
• Studija se ne provodi tijekom menstruacije i 3 dana nakon nje.
• Dva dana prije testa trebate izbjegavati spolni odnos.
• Dijagnostika se provodi na prazan želudac, posljednji obrok trebao bi biti 12 sati prije analize. Ali možete piti vodu.
• Na dan uzimanja HPV PCR testa ne preporučuje se provođenje higijenskih postupaka ili odlazak na WC dva sata prije prikupljanja materijala.

Dobivene rezultate treba interpretirati liječnik. Pokazatelj do 3 Lg je beznačajna koncentracija patogena, 3-5 Lg je klinički značajna koncentracija, a više od 5 Lg je visoka. Normalno, svi kvantitativni titri trebaju biti negativni. Ali negativni rezultati ne ukazuju uvijek na odsutnost bolesti. To se često opaža kod beznačajnih koncentracija virusa u tijelu i kada ga potiskuje imunološki sustav.

Unatoč svim prednostima, PCR ima niz nedostataka. Analizu treba provoditi samo u modernom laboratoriju kako bi se izbjegli lažni rezultati. Posebnu pozornost treba posvetiti prikupljanju materijala. Samo liječnik treba dešifrirati rezultate, budući da se pozitivni rezultati mogu pojaviti nakon nedavnog liječenja infekcije.

Struganje na humani papiloma virus

Za otkrivanje genitalne HPV infekcije kod muškaraca provodi se struganje, odnosno Digene test. Materijal se prikuplja iz uretralnog kanala pomoću posebne četkice; u nekim slučajevima tkivo se uzima s glavića penisa. Prije testa morate se istuširati i temeljito oprati. Kršenje osobne higijene negativno utječe na rezultate testa.

Kod žena se uzima struganje s vrata maternice ako se sumnja na displaziju, eroziju i druge patološke procese uzrokovane HPV-om. Za prikupljanje materijala, liječnik uklanja vaginalni iscjedak i ubacuje malu četkicu u organ, okrećući je oko osi u cervikalnom kanalu. Nakon svih manipulacija, četkica se stavlja u epruvetu s medijem i šalje u laboratorij.

Dobiveni materijali šalju se na diferencijalnu dijagnostiku PCR metodom; citološki probir se ne provodi. Rezultati su gotovi 2-3 dana nakon analize. Dobiveni podaci predstavljaju potpune informacije o vrsti virusa, njegovoj kancerogenosti i nizu drugih čimbenika u tijeku bolesti. Ako su rezultati netočni, studija se provodi ponovno. Ponovljeni probir je potreban tijekom liječenja i nakon terapije kako bi se utvrdila njezina učinkovitost.

Bris za humani papiloma virus

Ako se tijekom ginekološkog pregleda pronađu bradavice ili kondilomi u genitalnom području, liječnik uzima bris na HPV. Liječnik posebnom četkicom prelazi preko zahvaćenih tkiva. Bris se uzima iz cervikalnog kanala kod žena i iz uretre kod muškaraca. Prikupljeni biopsijski uzorak šalje se u laboratorij na pregled.

Sljedeće vrste briseva koriste se kada se sumnja na humani papiloma virus:

• PCR – detektira DNK infekcije. Za provođenje ove analize uzima se strugotina iz uretre kod muškaraca, iz vagine i cervikalnog kanala kod žena. Mogu se koristiti i sjeme ili urin.
• Digene testiranje je proučavanje prikupljenog materijala na molekularnoj razini. Testiranje je istovremeno diferencijacija dvije skupine papiloma infekcija - s visokom i niskom onkogenošću.

Gore navedene studije klasificiraju rezultate u 5 tipova:

1. Odsutnost atipičnih stanica.
2. Prisutnost promijenjenih stanica zbog upalnog procesa.
3. Minimalni broj stanica s atipičnom strukturom.
4. Maligne stanice.
5. Veliki broj onkogenih stanica.

Postoji i klasifikacija prema Bethesda sustavu. Sastoji se od pokazatelja niskog i visokog stupnja promjena. U ovom slučaju, dekodiranje razmaza predstavljeno je sljedećim podacima:

• NILM – normalni epitel.
• ASCUS – promijenjene stanice zbog displazije, upale, spolno prenosive infekcije ili HPV-a.
• ASC-H – otkrivene su abnormalnosti u strukturi pločastog epitela. Ovaj rezultat ukazuje na rane stadije onkologije ili tešku displaziju.
• LSIL – u razmazu je prisutan mali broj promijenjenih stanica. Ukazuje na displaziju ili papilomavirus.
• HSIL – značajne promjene u epitelu. Teška displazija i izražena onkologija. Ako se ovaj rezultat zanemari, tada 7% pacijenata razvije malignu bolest u 3-5 godina.
• AGC je atipični žljezdani epitel. Javlja se kod raka maternice ili displazije.
• AIS – rane faze onkologije.
• Visokostupanjski SIL – karcinom skvamoznih stanica.

Brzina dobivanja rezultata razmaza ovisi o odabranoj metodi istraživanja. U pravilu, dekodiranje je spremno za 2-3 dana.

[ 12 ], [ 13 ], [ 14 ], [ 15 ], [ 16 ], [ 17 ], [ 18 ], [ 19 ], [ 20 ]

Antitijela na humani papiloma virus

Za otkrivanje antitijela na HPV indiciran je enzimski imunološki test krvi. Princip ove studije je određivanje prisutnosti imunoglobulina na zarazni agens. Dijagnostika ELISA metodom ukazuje na imunološki odgovor tijela na virus. Ovisno o otkrivenim antitijelima, razlikuju se sljedeći stadiji bolesti:

• IgM – akutni.
• IgG – kronično ili razdoblje oporavka.
• IgA – recidiv kronične infekcije.

Rezultati testa na antitijela spremni su 1-3 dana nakon uzimanja. Prilikom dešifriranja rezultata treba uzeti u obzir da humani papiloma virus može biti indirektni trag, stoga se provode PCR i drugi testovi kako bi se razjasnila prisutnost infekcije. Osim toga, ELISA ne utvrđuje genotip ili rizik od karcinogenosti virusa.

[ 21 ], [ 22 ], [ 23 ], [ 24 ], [ 25 ], [ 26 ], [ 27 ], [ 28 ], [ 29 ], [ 30 ]