Virus hepatitisa B

Hepatitis B je zarazna bolest osobe karakterizirane selektivnim oštećenjem jetre virusom. Ovaj oblik hepatitisa je najopasniji u posljedicama svih poznatih oblika virusnog hepatitisa. Njegov uzročnik je virus hepatitisa B (HBV).

Prvo antigen virusa hepatitisa B je otkrivena B. Blumberg 1964. Godine u serumu Australski Aboridžini i patogen pronađena je u 1970, D. Dane (et al.), A dobio je ime Dane čestica, jer nije bilo sigurno da , da je ovo stvarno virus, a ne njegove komponente. Nakon toga su sve sumnje nestale, jer su u Dane česticama pronađene genomske DNA i virusna DNA DNA koja je ovisna o DNA. Virion sadrži tri glavna antigena, za koje su 1974. Uvedene sljedeće oznake:

• HBsAg je površinski ili topljivi ili australski antigen.
• HBcAg je jezgreni antigen (ko-antigen).
• HBeAg - e antigen, je lokaliziran u jezgri virion i, za razliku od HBcAg, ne samo da je prisutan u virion, ali cirkulira u krvi u slobodnom obliku ili u obliku kompleksa s anti-HBeAg. Izlučuje se u krv iz hepatocita s aktivnom replikacijom HBV.

Površinski antigen - HBsAg - postoji u obliku tri morfološki različite inačice: 1) predstavlja superkapozid cijelog viriona; 2) u velikim količinama dolazi u obliku čestica promjera 20 nm, s kuglastim oblikom; 3) u obliku vlakana duljine 230 nm. Kemijski su identični. Pripravak ima ukupno HBsAg antigen i dva para međusobno isključiva determinante specifične za tip: d / y i w / r, tako da postoje četiri glavna podtipa HBsAg (a time i HBV) ADW, ADR i ayw Aur. Antigen a osigurava stvaranje zajedničkog križnog imuniteta na sve podtipove virusa.

Zapravo, virion, čestica Dain, ima sferični oblik i promjer od 42 nm. Supkapsid viriona sastoji se od tri proteina: glavna (glavna), velika i srednja. Genom je zatvoren u kapsidu i predstavlja dvolančanu prstenastu DNA s masom od 1,6 MD. DNK se sastoji od približno 3200 nukleotida, ali njegov "plus" je 20-50% kraći od znaka minus. Sa 5 'krajem dugih vlakana, virus-specifični protein je kovalentno vezan. 5 'krajevi obaju niti su komplementarni i formiraju "ljepljive" sekvence 300 nukleotida duljine, tako da su niti zatvorene u prstenu. Sadržaj G + C u virion DNA je 48-49 mol%. U jezgri viriona nalazi se osim genomske DNA-viralne DNA-ovisne DNA polimeraze. "Minus" -define DNA HBV sadrži samo četiri gena (S, C, P i X), ali su organizirani vrlo kompaktno. Geni S, C, P, X se jako preklapaju i kontroliraju sintezu sljedećih proizvoda. Gene S kodira za sintezu glavnog proteina i sadrži sve informacije o površinskom antigenu HBsAg. Osim toga, ona kodira sintezu srednjih i velikih proteina omotnice. Proteini sadrže zajednički COOH-terminus, ali njihovo prevođenje započinje s tri različita kodona inicijatora. Gene C kodovi za sintezu kapsidnih proteina (HBcAg i HBeAg); iako su ti proteini kodirani jednim genom, načini njihovog prevođenja su različiti. Gene P je najveći. Uključuje dio svih triju drugih gena i kodira enzime potrebne za replikaciju virusa. Konkretno, kodira reverznu transkriptazu, domenu enzima RNA-ase H, 5'-terminalni protein "minus" lanca. Gene X kodira proteine koji reguliraju ekspresiju (ekspresiju) svih viralnih gena, osobito proteina s masom od 17 kD, koja je transkripcijski transkripcijski gen.

Proteini koji tvore površinski antigen postoje u glikoziliranom (gp) i ne-glikoziliranom obliku. Glikozilirani su gp27, gp33, gp36 i gp42 (brojevi su označeni m u kD). Supercapsid HBV se sastoji od glavnog, ili bazičnog, S-proteina (92%); prosječni M protein (4%) i veliki, ili dugi, L-protein (1%).

• Glavni protein, p24 / gp27, ili glavni protein (protein S), glavna je komponenta HBV omotnice. U odsutnosti drugih proteina ljuske, ona polimerizira i oblikuje kuglaste čestice promjera 20 nm, koje se sastoje od 100 polipeptidnih molekula.
• Veliki protein, p39 / gp42, ili dugi protein (L protein), prisutan je u sva tri oblika HBsAg. Ona igra važnu ulogu u morfogenezi viriona i njihovom izlasku iz stanice. Protein L sadrži sekvencu proteina M koja se nadopunjuje na N-kraju sekvencijama od 108 (ayw) ili 119 (adw, adr, ayr) aminokiselinskih ostataka kodiranih od npe-Sl regije S gena.
• Srednji protein - gp33 / gp36, ili protein M, također je prisutan u sva tri morfološka oblika HBsAg. Protein M sadrži, na N-terminalu, područje od 55 aminokiselinskih ostataka kodiranih od pre-52 područja S gena. Pretpostavlja se da ova stranica igra važnu ulogu u prepoznavanju virusa hepatitisa B jetrenim stanicama ograničenog raspona domaćina (ljudski, čimpanzijski majmun). Proteinske sekvence kodirane s regijama S-gena npe-S imaju visoku imunogenost, a njihove odrednice nalaze se na površini viriona. Stoga antitijela protiv tih antigena igraju važnu ulogu u formiranju imuniteta protiv hepatitisa B.

Sinteza virusnih proteina je čvrsto kontrolirana na razini transkripcije i translacije. U transkripciji virusnog genoma sintetizirane su dvije vrste mRNA:

• manje - 2100 nukleotida - kodira glavne i srednje proteine membrane;
• velike - 3.500 nukleotida, tj. Duže od same genomske DNA; sadrži terminalne ponavljanja od 100 nukleotida u dužini.

Ova vrsta mRNA kodira kapsidni protein i proizvode gena P, a također je i predložak za virusnu DNA replikaciju. Kao dio genoma, postoje pojačivači (pojačivači transkripcije) - regulacijski elementi koji aktiviraju ekspresiju svih virusnih gena i djeluju prvenstveno u stanicama jetre. Konkretno, gen S se izražava na vrlo visokoj razini samo u stanicama jetre i pod utjecajem steroidnih hormona. Ova okolnost objašnjava zašto se kod muškaraca u kroničnom hepatitisu B i karcinomu jetre (hepatoma) uočava češće nego kod žena koje imaju nižu razinu steroidnih hormona.

Drugi regulatorni elementi virusa hepatitisa B moduliraju (kontroliraju) razine sinteze pojedinih bjelančevina. Na primjer, veliki protein se sintetizira samo u malim količinama. Većina je na površini zaraznih viriona. I glavni protein i, u manjoj mjeri, srednji protein se sintetiziraju u ogromnim količinama i ostavljaju stanice u površinskim česticama antigena, koje u serumu sadrže mnogo puta više od zrelih viriona. Broj čestica površinskog antigena može biti 1011 -1013 po 1 ml krvi (nekoliko stotina μg).

Virus hepatitisa B izoliran je u novoj obitelji virusa - Hepadnaviridae, roda Orthohepadnavirus. Slični hepadnavirusi su pronađeni u raznim životinjama (zemljani proteini, marmots, chipmunks, Peking pečenja).

Reprodukcija hepadnavirusa odvija se na neobičan način. Posebno, replikacija genomske DNA javlja se preko intermedijalne veze - RNA, tj. S mehanizmom reverzne transkripcije.

Životni ciklus hepatitisa B virus.

• Adsorpcija na ćeliji.
• Prodiranje u stanice putem endocitoze izazvane pomoću receptora mehanizma (graniči pit -> obrubljenim bočicu -> -> lizosoma nucleocapsid izlaz i ulaska virusnog genoma u jezgru hepatocita).
• Intracelularna reprodukcija.

Tijekom penetracije u ćeliju, kratki ("plus") DNA lanac produljuje (dovršava). U jezgri, stanična DNA-ovisna RNA polimeraza sintetizira RNA od 3.500 nukleotida (pregena) i manjih mRNA za sintezu virusnih proteina. Zatim, pregnen i virusna DNA polimeraza se pakiraju u novo sintetizirani kapsid, koji se prenosi u citoplazmu. Ovdje dolazi do reverzne transkripcije pregenoma. Sintetizira novu "minus" -define DNA. Nakon što je sinteza minus DNA završena, pregnomska RNA je uništena. Virionska DNA polimeraza na "minus" lanci sintetizira "plus" lanac. Virusna DNA, sada dvostruko nasukana, može dulje vrijeme postojati u stanici i vratiti se u jezgru za sljedeći ciklus replikacije. Ako novi virusnih čestica ne podvrgava daljnjem replikacije, nukleokapsid tvore prolaze kroz staničnu membranu, prekriven, superkapsidom pupoljak iz stanice, a odmah je zaustavljena kratko produljenje „plus” lanac DNK. Zato se dužina ove nit varira. U tipičnom akutni oblik hepatitisa B seroloških markera sljedećim redom prikazuju u krvi: HBsAg, HBsAg i protutijela (IgM, IgG): anti-HBcAg. Anti-HBeAg i anti-HBsAg.

Sastav virusa hepatitisa B imaju onkogen, a nađeno da prodire u stanični kromosom (u svojim različitim dijelovima), virusna DNA se može inducirati u njima različite genetske podešavanje - delecija, translokacije, pojačanje, što može uzrokovati razvoj raka jetre - jedan od najozbiljnijih posljedica virusnog hepatitisa B.

[1], [2], [3], [4], [5], [6], [7], [8],

Otpornost na hepatitis B virus

Virus hepatitisa B je vrlo otporan. Na sobnoj temperaturi ostaje na snazi 3 mjeseca, u smrznutom stanju - već nekoliko godina. Virus potpuno inaktivan u autoklavu (120 ° C), na refluksu tijekom 30 minuta, sa suhim topline, na temperaturi od 180 „C tijekom 60 minuta, na 60 ° C -, za 10 sati rezistentnih u kiselom mediju, a uništena u baznom. Virus se umre kada se tretira s H202, kloraminom, formalinom, fenolom i UV zračenjem.

Patogeneza i simptomi hepatitisa B

Virus se izravno ubrizgava u jetru. U patogenezi hepatitis, autoimuni humoralni i stanični odgovori igraju važnu ulogu. Pretpostavlja se da je hepatocita gubitak zbog ne toliko do izravnog djelovanja samog virusa, ali domaćina imunološke reakcije koje se javljaju u svezi s modifikacijom stanične membrane virusnih proteina koji uzrokuju pojavu autoantitijela u stanicama jetre. Stoga se razvoj kroničnog hepatitisa i ciroze jetre može smatrati autoimunim bolestima.

Stanične autoimune reakcije na viralne proteine sadržane u hepatocitnoj membrani posredovane su s T-citotoksičnim limfocitima i drugim stanicama jetrenih ubojica. Stoga, akutna distrofija jetre može se smatrati reakcijom odbacivanja osebujnog heterograft.

Razdoblje inkubacije traje od 45 do 180 dana, u prosjeku 60 do 90 dana. Klinički tijek hepatitisa B karakterizira velika raznolikost; bolest se može pojaviti: u latentnom obliku, otkrivenom samo laboratorijskim metodama, u tipičnom icteričkom obliku iu malignom obliku koji završava smrtonosno. Trajanje pre-jaundiced stage varira od jednog dana do nekoliko tjedana. Ikteričan rok je obično dug i karakterizira dobro definiranih simptoma (žutice, hiper, tamni urin, žutica bjeloočnice). Razvučen oblik opaža u 15-20% pacijenata, a 90% njih razvije kronični hepatitis B. Pacijenata s kroničnim oblik često uočene autoimunih procesa prati visokim sadržajem protivopechenochnyh antitijela koja su detektirana pomoću enzimskog imunosorbent testa (IPM). Kod djece, hepatitis B je blaga i često bez žutice, u maloj djeci - uglavnom asimptomatski.

Postinfekcijski imunitet (humoralni i stanični) je dug, cjeloživotno, zbog antitijela koja neutraliziraju virus (anti-HBsAg) u odsutnosti površinskog antigena u krvi. Često je promatrana latentna imunizacija zbog ponovljenog kontakta s HBV, što je uzrok rasprostranjenog imuniteta virusa među populacijom. Obično bolesnici s akutnim oblikom hepatitisa B potpuno se oporavljaju dok se antitijela nakupljaju. Međutim, u nekim slučajevima, unatoč visokoj razini virusnog antigena u krvi (okolnost koja objašnjava zašto se parenteralna infekcija javlja najčešće), protutijela na nju nisu proizvedena. Virus ostaje u jetri, a osoba dugo, ponekad za život postaje kronični nosač. Ta je okolnost očito povezana sa slabim imunološkim odgovorom. Jedan od najčešćih ishoda kroničnog hepatitisa B je ciroza i rak jetre, koji se razvija nakon latentnog razdoblja do 30-50 godina.

Epidemiologija hepatitisa B

Izvor infekcije virusom hepatitisa B je samo čovjek. Za razliku od prijašnjih prikaza da je infekcija s virusom hepatitisa B javlja isključivo parenteralno, sada je dokazano da se nalazimo u raznim izlučevinama i izlučevinama :. Slina, nazofarinksa sekretima, izmet, suzna tekućina, sjemena, menstrualne krvi, itd Tako, infekcija se javlja ne samo parenteralno, ali i seksualne i vertikalna (s majke na fetus), t. E. Gotovo infekcija virusom hepatitisa B može na mnogo načina.

Hepatitis B u svijetu je ubio onoliko ljudi koliko i tijekom svih godina Drugog svjetskog rata. Broj nositelja HBV-a, prema WHO-u, iznosi od 0,1 do 20% populacije različitih zemalja ili regija.

[9], [10], [11], [12], [13], [14], [15], [16],

Dijagnoza hepatitisa B

Trenutno je glavna metoda za dijagnosticiranje hepatitisa B upotreba reverzne pasivne hemaglutinacije (ROSGA) za otkrivanje virusa ili njegovog površinskog antigena, HBsAg. Kao što je već napomenuto, krv površinskog antigena sadrži mnogo puta više od samog virusa (100-1000 puta). Za reakciju ROPGA, eritrociti se senzibiliziraju antitijelima protiv hepatitisa B virusa. Ako postoji antigen u krvi, dolazi do hemaglutinacije. ROPGA je jednostavan, praktičan, vrlo specifičan. Za otkrivanje protutijela antigenu virusa HBsAg koriste se različite imunološke metode (DSC, RPGA, IFM, RIM, itd.). Osim toga, PCR varijante koriste se za otkrivanje HBV i njegovih antigena.

Različite imunološke metode mogu se upotrijebiti za otkrivanje protutijela virusnom antigenu (HBsAg) u serumu bolesnika (DSC, RPGA, reakcija taloženja, IFM, RIM, itd.).

[17], [18], [19], [20], [21], [22],

Specifična prevencija hepatitisa B

S obzirom na visoku učestalost hepatitisa B, kao i da u svijetu postoje mnogi nositelji HBV, u skladu s preporukama SZO cijepljenih protiv hepatitisa B su obvezni i moraju se provoditi u prvoj godini života. Predložene su dvije vrste vakcina za cijepljenje. Za pripremu jednog od njih, plazma prijenosnika virusa se koristi kao sirovina, jer je virusni antigen u njemu sadržan u količinama dovoljnim za pripravu cjepiva. Glavni uvjet za pripremu ove vrste cjepiva je njihova cjelovita sigurnost, tj. Kompletna inaktivacija virusa, koja je osigurana tehnologijom pripreme cjepiva. Da bi se proizvodilo cjepivo drugačijeg tipa, upotrebljavaju se metode genetičkog inženjeringa, posebno rekombinantni klon kvasca koji proizvodi površinski antigen virusa hepatitisa B koji se koristi za pripravu antigenskog materijala.

Oba cjepiva su vrlo učinkovita (štite 95% cijepljenih). Trajanje postvaccinalnog imuniteta nije manje od 5-6 godina. Cjepiva su stvorena i za odrasle, za dojenčad i za malu djecu - najvažnija komponenta globalne borbe protiv hepatitisa B. Cijeli tijek cijepljenja sastoji se od tri injekcije:

Doza - odmah nakon rođenja; II doza - nakon 1-2 mjeseca; III doza - do kraja prve godine života.

Ova cjepiva uključeni u proširenom programu imunizacije, WHO i usklađen s kalendarom njegove provedbe (prema preporukama SZO na 1. Godini života provodi cijepljenje protiv tuberkuloze, dječje paralize, hepatitisa B, ospica, tetanusa, difterije, pertusisa).

Gammaglobulin, koji sadrži antitijela protiv HBV, koristi se za hitnu pasivnu imunoprofilaksu osobama koje su imale kontakt s pacijentom hepatitisa B.

Za liječenje hepatitisa B (akutni i kronični oblici) koristite interferon i amixin (za indukciju endogene sinteze). U liječenju kroničnog hepatitisa B, novi lijekovi lamivudina (sintetski nukleozid) djelotvorni su.