Salmonella - patogeni tifusa i paratifida

Tifus - jaka akutna zarazna bolest karakterizirana dubokim općom intoksikacije, baketrijemije i specifične naprave limfnog crijevne. Toksičnost se manifestira jakom glavoboljom, zbunjenjem, delirijem (tifus grčkog tifos - magle). Tifus kao samostalna nosological jedinice po prvi put pokušao izolirati ruski liječnik AG Pyatnitskii natrag u 1804, ali je na kraju učinio u 1822 R. Breton, koji je razlikovati ovu bolest od crijevne tuberkuloze i predložio zaraznu prirodu tifusa.

Uzročnik tifusa - Salmonella typhi - je otkriven 1880. K. Ebert i izolira u čistom kulturom 1884. K. Gaffki. Brzo su izolirani i proučavani patogeni paratifus A i B - S. Paratyphi A i S. Paratyphi B. Salmonella razred uključuje veliku skupinu bakterija, ali samo tri od njih - S. Typhi, S. Paratyphi A i S. Paratyphi B - uzrokuju bolest kod osobe koja ima kliničku sliku tifusne groznice. Morfološki ne razlikuju - kratki gram-negativni štapići sa zaobljenim krajevima i dužine 1-3.5 mikrona promjera 0,5-0,8 mikrona; spore i kapsule ne formiraju, imaju aktivnu pokretljivost (peritrichi). Sadržaj G + C u DNA je 50-52 mol%.

Patogenima tifus i paratifus - fakultativne anaerobe, optimalnu temperaturu za rast 37 ° C, (a može rasti u rasponu od 10 do 41 ° C), pH 6.8-7.2; ne zahtijevaju hranjive tvari. Rast na bujonu prati zamućenost, na MPA, formiraju se okrugle, glatke, prozirne kolonije promjera 2-4 mm. Međutim, S. Typhi kolonije koje imaju Vi-antigen su mutne. Kolonije S. Paratyphi U većoj grubosti, nakon nekoliko dana, formiraju se duž perifernih neobičnih valjaka. Na Endomo okruženjima, kolonije svih triju salmonela su bezbojne, na bizmut-sulfitagar - crnoj. U slučaju disocijacije na gustim medijima rastu kolonije R-oblika. Selektivno okruženje za uzročnike tifusne groznice i paratifusa je žuč ili žučna mješavina.

[1], [2], [3], [4], [5], [6],

Biokemijska svojstva patogena tifusa i paratifida

Patogenima tifus i paratifus dati pozitivnu reakciju s MR, ne tvori indol nije ukapljeni želatinu, smanjenje nitrate do nitrita, ne tvore acetoin. S. Typhi ne raste na gladnom agaru s citratom. Glavni Biokemijske razlike između patogena tifus i paratifus zaključiti da S. Typhi neke fermentira glukozu i druge ugljikohidrate da se dobije kiselina samo u S. Paratyphi A i S. Paratyphi B - i da se dobije kiselina i plin.

S. Typhi na sposobnost fermentacije ksiloze i arabinoze podijeljeni su u četiri biokemijske vrste: I, II, III, IV.

Ksiloza + - + -

Arabinoza - - + +

[7], [8], [9], [10],

Antigenska struktura patogena tifusa i paratifida

Salmonele imaju O i H antigene. Na O-antigena oni su podijeljeni u veliki broj serotipova, a prema H-antigensima - u serotipove (za više detalja o serološkoj klasifikaciji salmonele, vidi sljedeći odjeljak). S. Typhi, S. Paratyphi A i S. Paratyphi B se međusobno razlikuju kako u smislu O-antigena (pripadaju različitim serotipovima), tako i H-antigena.

1934, A. P. Felix i Pitt otkrili da pored S. Typhi O i H antigena je drugi površinski antigen, koje su nazvali virulencije antigen (VI-antigen). Prema kemijskoj prirodi Vi-antigena različit od O i H antigeni se sastoji od tri različite frakcije, ali je baza je N-polimer atsetilgalaktozaminouronovaya kiseline s m. M. 10 MD. Vi antigena obično otkriven u svježe izoliranim kulturama, a to se lako izgubiti pod utjecajem različitih faktora (posebice kada se uzgajaju na temperaturi iznad 40 ° C i ispod 20 ° C, u mediju koji sadrži karbolne kiseline i m. N.) na duge pohrane kultura, uništava se na temperaturi od 100 ° C tijekom 10 minuta. Budući da se nalazi više od površne O-antigena, njegova prisutnost sprječava sljepljivanje kulture S. Typhi O-serum, tako da kultura mora provjeriti u aglutinacijom s Vi-seruma. Naprotiv, gubitak Vi antigena dovodi do oslobađanja O-antigena i restauracije O-aglutinacije, ali je Vi-aglutinacija izgubljena. Kvantitativni sadržaj VI-antigena u S. Typhi može varirati, tako da F. Kauffmann predlaže se klasificirati sadržaj S. Typhi Vi-antigena u tri skupine:

• čisti v-oblici (njemački viel - mnogi);
• čisti w-oblici (njemački wenig - mali);
• srednje vw-oblike.

Pronađeno je tri neuobičajena mutanta S. Typhi: Vi-I-R-oblik, stanice nemaju H- i O-antigene, ali ustrajno zadržavaju Vi-antigen; O-901 - bez H- i Vi-antigena; H-901 - sadrži O- i H-antigene, ali je lišen Vi-antigena. Sva tri antigena: O-, H- i Vi- imaju izražena imunogena svojstva. Prisutnost Vi-antigena omogućuje da kultura S. Typhi bude fag tipa. Postoje dvije vrste faga koje lize samo one kulture koje sadrže Vi antigen: Vi-I je univerzalni fag, lizira većinu kultura S. Typhi koje sadrže Vi; i skup Vi-II faga liziranja S. Typhi kulture selektivno. To je prvi put 1938. Prikazao J. Craig i K. Ian. Uz pomoć Vi-faga tipa II, podijelili su S. Typhi u 11 vrsta faga. Do 1987. Identificirano je 106 različitih Vi-fag tipova S. Typhi. Njihova osjetljivost na odgovarajuće fage je stabilan znak, stoga fagotipizacija ima važan epidemiološki značaj.

Također su razvijene sheme fagotipizacije S. Paratyphi A i S. Paratyphi B, prema kojima su podijeljene na desetke fagotipova. Značajno je da se fagotipi salmonele ne mogu međusobno razlikovati na bilo koji drugi način.

[11], [12], [13], [14],

Otpornost na patogene tifusa i paratifida

Uzročnici tifusa i paratifida u vanjskom okolišu (voda, tlo, prašina) i dalje postoje, ovisno o uvjetima, od nekoliko dana do nekoliko mjeseci. Tekuće vode može preživjeti i do 10 dana, kongestivno - do 4 tjedna na povrće i voće -. 5-10 dana na jela - do 2 tjedna, u maslac, sir. - 3 mjeseca, na ledu - do 3 mjeseca , i više; grijanje na temperaturi od 60 ° C ubija za 30 minuta i kuhanje - odmah. Konvencionalni kemijski dezinficijensi ubijaju ih za nekoliko minuta. Sadržaj aktivnog klora u vodi iz slavine pri dozi od 0.5-1.0 mg / l ili ozonizacije vode osigurava njegovu pouzdanu dezinfekciju i od Salmonele i drugih patogenih crijevnih bakterija.

Čimbenici patogenosti patogena tifusa i paratifida

Najvažnija biološka značajka uzročnika tifusne groznice i paratifova A i B je njihova sposobnost da izdrže fagocitozu i umnažaju se u stanicama limfoidnog sustava. Oni ne tvore egzotoksine. Glavni čimbenik njihove patogenosti, uz Vi-antigen, je endotoksin, koji je karakteriziran neuobičajeno visokom toksičnošću. Patogenosti čimbenici kao što fibrinolizin, plazmokoagulaza, hijalourinidazom i Lecithinase t. N., nalaze se u patogeni tifusa i paratifus vrlo rijetke. Najveća frekvencija nalazi se u DNA-ase (75-85% ispitanih S. Typhi i S. Paratyphi B kultura). Utvrđeno je da su sojevi S. Typhi koji imaju plazmid s 6 mM više virulentni. Stoga, pitanje faktora patogenosti tih salmonela ostaje za proučavanje.

[15], [16], [17],

Postinfekcijski imunitet

Trajne, produžene, ponavljane bolesti tifusa i paratifida su rijetke. Imunost je uzrokovana pojavom protutijela na Vi, O i H antigene, imunosne memorijske stanice i povećanu aktivnost fagocita. Postvaccinalni imunitet, za razliku od postinfekcije, kratkotrajan je (oko 12 mjeseci).

Epidemiologija tifusa i paratifida

Izvor tifusne groznice i paratifoi A je samo osoba, bolest ili prijevoznik. Izvor paratifida B, uz čovjeka, može biti životinja, uključujući ptice. Mehanizam infekcije je fekalno-usmeni. Zarazna doza S. Typhi od 105 stanica (uzrokuje bolest od 50% volontera), infekcija doza salmonele paratifida A i B je mnogo veća. Infekcija se javlja uglavnom kao rezultat izravnog ili neizravnog kontakta, kao i kroz vodu ili hranu, posebno mlijeko. Najveća epidemija uzrokovala je infekciju s patogenima (epidemija voda).

[18], [19], [20], [21], [22],

Simptomi tifusa i paratifida

Razdoblje inkubacije za tifusnu groznicu je 15 dana, ali može varirati od 7 do 25 dana. To ovisi o dozi inficiranja, virulenciji patogena i imunološkom stanju pacijenta. Patogeneza i klinička slika tifusne groznice i paratifova A i B su vrlo slični. U razvoju bolesti vidljive su sljedeće faze:

• stupanj invazije. Ruzno sredstvo prodire kroz usta u tankog crijeva;
• kroz limfne načina Salmonela unijeti limfna formacija tankog crijeva submukozi (Peyerovih zakrpe i osamljeni folikula) i umnožavanju, uzrok lymphangitis i limfadenitisu (originalni trbušni tifus-granula);
• bakteremija - izlazak patogena u velike količine u krv. Stadij bakteremije započinje na kraju razdoblja inkubacije i može (u nedostatku učinkovitog liječenja) nastaviti tijekom cijele bolesti;
• fazu opijanja dolazi zbog propadanja bakterija pod djelovanjem baktericidnih svojstava krvi i otpuštanja endotoksina;
• stupanj parenhima difuzije. Iz krvi se salmonela apsorbiraju makrofagi koštane srži, slezene, limfnih čvorova, jetre i drugih organa. Velik broj uzročnika tifusa akumulira u žučnih vodova u jetri i žuči, za koje je utvrđeno povoljne uvjete za njihovo razmnožavanje i gdje baktericidna svojstva krvi oslabio utjecaj žuči;
• alergijska faza izlučivanja. Kako formiranje imuniteta počinje proces oslobađanja od patogena. Taj proces izvode sve žlijezde: slinovnica, crijeva, znoja, mliječni proizvodi (tijekom hranjenja djeteta), urinarni sustav i posebno aktivno - jetra i žučni mjehur. Izolirani iz žučnog mjehura, Salmonella ponovno ulazi u tankog crijeva, iz kojeg se dio izlučuje izmetom, a neki ponovno ulaze u limfne čvorove. Sekundarni uvod u već osjetljive čvorove uzrokuje hiperergijsku reakciju u njima, koja se manifestira u obliku nekroze i stvaranja čira. Ova faza je opasna zbog mogućnosti perforacije crijevne stijenke (čireve), unutarnjeg krvarenja i razvoja peritonitisa;
• stupanj oporavka. Liječenje čireva javlja se bez pojave neugodnih ožiljaka na tlu, očišćenih nekrotičnim napadima.

S druge strane, u kliničkoj slici bolesti razlikuju se sljedeća razdoblja:

• Prva faza - povećanje stadija (1. Tjedan): postupno povećanje temperature do 40-42 ° C, povećanje opijenosti i drugih manifestacija bolesti.
• II - stupanj maksimalnog razvoja svih simptoma - stadion akme (2-3 tjedna bolesti): temperatura se održava na visokoj razini;
• III - stupanj recesije bolesti - četvrti decrementi (četvrti tjedan bolesti): postupno smanjenje temperature i smanjenje manifestacije drugih simptoma;
• IV - stupanj oporavka.

8-9 dana bolesti, a ponekad i kasnije, mnogi pacijenti pojavljuju roseolous osip na koži trbuha, prsa i leđa. Osip (male crvene točke) je posljedica lokalnih proizvodnih i upalnih procesa alergijske prirode u površinskim slojevima kože oko limfne žile, koji sadrže obilje patogen. Klinički oporavak ne podudara se uvijek s bakteriološkim. Oko 5% pacijenata postane kronični nosači salmonele tifusa ili paratifida. Razlozi dugoročnog (više od 3 mjeseca, a ponekad mnogo godina) prijevoza salmonele ostaju nejasni. Poznati vrijednost nosaču formiranja igrao lokalnom upalom u žuči (ponekad mokraćnog) trakta koje često nastaju u vezi s tifus, paratifus infekcije ili pogoršava kao rezultat tih infekcija. Međutim, jednako važnu ulogu u formiranju dugo prijevoznika Salmonella tifus i paratifus A i B ima L-transformacija njih. U obliku slova L Salmonella izgubiti H-, a djelomično 0-VI antigene obično nalaze, unutar stanice (u makrofagima koštane srži), a time nisu dostupni za bilo kemoterapije ili antitijela, te mogu ostati u tijelu dugo bio bolesne osobe. Vraćanja u prvobitni oblik i potpuno oporavlja njegov antigenski struktura salmonele ponovno postaje opet virulentnog prodrijeti žučnih, pogoršati proces bakterija, izlučuje s fekalijama i tako postaje nosač izvor infekcije za druge. Također je moguće da formiranje bakterijskog transporta ovisi o nekom deficitu imunološkog sustava.

Laboratorijska dijagnoza tifusa i paratifida

Najranije i osnovni postupak za dijagnosticiranje tifus i paratifus je bakteriološka - dobivanje kulturama krvi ili mielokultury. U tu svrhu ispitajte krv ili punktirate koštanu srž. Krv bolje posijati u mediju (Rapoport holne smjese pomiješa s indikatorom glukoze i plutaju stakla) u omjeru 1:10 (10 ml medija 1 ml krvi). Sijanje treba inkubira na 37 ° C u trajanju od najmanje 8 dana, uz moguću prisutnost L-oblika - do 3-4 tjedna. Za koriste identifikaciju Salmonella kulturama izoliranih (na temelju njihovih svojstava biokemijskim) dijagnostičko adsorbira serum koji sadrži antitijela na antigene 02 (S. Paratyphi A), 04 (S. Paratyphi B) i 09 (S. Typhi). Ako odabrani kulture S. Typhi ne aglutinacija 09-serum, potrebno je provjeriti s Vi-seruma.

Da bi se izolirala S. Typhi, moguće je koristiti eksudat, dobiven na hrskavicama roseolocultura koje rastu rose.

Bakteriološki pregled izmeta, mokraće i žuči se obavlja kako bi potvrdili dijagnozu, praćenje, bakteriološkog oporavka u odvodnim rekonvalescentima i za dijagnostiku bakterija. U ovom slučaju, materijal prethodno nasađene na obogaćivanje medija (medij koji sadrži kemikalije, kao što su selenit, koji inhibiraju rast E.coli i drugim predstavnicima crijevne flore, ali ne inhibiraju rast Salmonella), a zatim s medijem obogaćuje - za diferencijalno dijagnostičke mediju ( endo vismutsulfitagar), kako bi se izolirali i dobije izolirane kolonije ih čiste kulture prepoznati po gornjoj shemi. Detektirati O- i VI-antigen u serumu i stolice pacijenata može se koristiti s DGC TPHA diagnosticum antitijela, koagglyutinatsii reakcijskoj jedinici hemaglutinacijskim Ifm. Za brzu identifikaciju S. Typhi obećavajuće primjenu kao sonde DNA fragment koji nosi gen VI-antigena (identifikaciju 3-4 sati).

Od kraja 1. Tjedna bolesti u bolesnika s serumskih antitijela pojaviti, dakle, za dijagnozu tifusa 1896., F. Vidal je predloženo ispitivanje reakcija cijev aglutinacija je angažiran. Dinamika antitijela na S. Typhi svojstven: prije svega su antitijela na antigen-O titra nego su se brzo smanjile nakon oporavka; H-protutijela pojavljuju se kasnije, ali oni traju već godinama nakon bolesti i cijepljenja. Imajući to na umu, da se reakcija stavi Vidal istovremeno odvajanje O- i N-diagnosticums (a također i paratifus A i B), kako bi se izbjegle diagnosticums moguće pogreške zbog imunizaciju prethodno prenose ili bolesti. Međutim, specifičnost Widal reakcija nije dovoljno visoka, tako da je poželjna primjena TPHA uključen, pri čemu je diagnosticum senzibilizirani eritrocita ili O- (O detekcija antitijela) ili VI-antigen (detektirati VI-antitijela). Najpouzdanija i specifična posljednja je reakcija (Vi hemaglutinacija).

Dijagnoza bakterijskog prijenosa tifusa i paratifida

Jedini dokaz je izolacija bakterija iz medija kulture S. Typhi, S. Paratyphi A, S. Paratyphi Materijal za istraživanje su sadržaji dvanaesnika, izmet i urin. Složenost problema leži u činjenici da nositelji ne izlaze uvijek s ovim podlogama, postoje pauze i dosta dugo. Kao pomoćno metode koje omogućuju uski raspon ispitanih pojedinaca upotreba serološka ispitivanja (istovremenu detekciju O-, H-, Vi- ili O, VI-protutijela ukazuje na moguću prisutnost patogena u tijelo) i alergijski kožni test s Vi-Tifina rijeke. Potonji sadrži Vi-antigen, koji je u kontaktu s antitijelima VI daje lokalnu alergijske reakcije kao crvenilo i oteklina za 20-30 min. Pozitivna reakcija s Vi-typhinom ukazuje na prisutnost Vi antitijela u tijelu i moguću prisutnost S. Typhi. Identificirati L-oblika S. Typhi nudi posebnu immunofluorestsiruyuschie antitijela (antigena L-oblika patogena). V.Murom ponudio je izvornu metodu za otkrivanje bakterijskih nosača. Sastoji se od proučavanja tampona, istodobno bačenih u kanalizacijske kanale po cijeloj kanalizacijskoj mreži naselja.

[23], [24], [25], [26], [27], [28]

Liječenje tifusa i paratifida

Liječenje tifusne groznice temelji se na korištenju raznih antibiotika, na koje patogeni pokazuju visoku osjetljivost (levomicetin, ampicilin, tetraciklini, itd.). Antibiotici smanjuju ozbiljnost tijeka bolesti i skraćuju njegovo trajanje. Međutim, prijenos R-plazmida salmonelima iz E. Coli ili drugih enterobakterija može dovesti do pojave opasnih epidemijskih klonova među njima.

Specifična profilaksa tifusa i paratifida

Umjesto sedam različitih tifusnih cjepiva, koja su se ranije koristila, od 1978. Godine, u našoj je zemlji proizvedeno samo jedan - kemijski sorbirani trbušni tifus monovalentni. Međutim, s obzirom na činjenicu da je tifus epidemija bolesti preselio u kategoriju sporadično (a to je omogućeno prvenstveno zahvaljujući poboljšanim vodom i odvodnje i poboljšanje sanitarne kulture stanovništva), potreba za masovnu imunizaciju protiv njega nestao. Stoga, inokulacija od tifusne groznice se provodi samo u slučaju epidemijskih indikacija.