Lančana reakcija polimeraze (PCR) u dijagnostici zaraznih bolesti
Posljednji pregledao: 23.04.2024
Svi iLive sadržaji medicinski se pregledavaju ili provjeravaju kako bi se osigurala što je moguće točnija činjenica.
Imamo stroge smjernice za pronalaženje izvora i samo povezujemo s uglednim medijskim stranicama, akademskim istraživačkim institucijama i, kad god je to moguće, medicinski pregledanim studijama. Imajte na umu da su brojevi u zagradama ([1], [2], itd.) Poveznice koje se mogu kliknuti na ove studije.
Ako smatrate da je bilo koji od naših sadržaja netočan, zastario ili na neki drugi način upitan, odaberite ga i pritisnite Ctrl + Enter.
PCR - jedan od načina za DNA dijagnostiku dopuštajući za povećanje broja kopija detektabilnim dijela genoma (DNA) bakterija ili virusa je milijun puta pomoću enzima DNK polimeraze. Test za taj određeni genomski segment nukleinske kiseline uzastopno se množi (pojačanog) koja omogućuje njegovu identifikaciju. Prvo, molekula DNA bakterija ili virusa zagrijavanjem podijeljen u dva lanca, a zatim u prisutnosti sintetizirane DNA klica (sekvencom nukleotida specifičnih definiranom genomske) ih veže s komplementarnim proteže DNA, sintetiziran je drugi lanac nukleinske kiseline, nakon svake klice u prisutnosti termostabline DNA polimeraze , Ispada dvije molekule DNA. Postupak se ponavlja više puta. Za dijagnozu, samo jedna molekula DNA, odnosno jedna bakterija ili virus čestica. Reakciju dodatni korak - sinteze DNA na RNA molekule pomoću enzima reverzne transkriptaze - je ostavljena da se testirati RNK virusa kao što je HCV virus. PCR - procesa u tri stupnja, ponavljanje ciklusa denaturacije, žarenje početnica, sinteza DNA (polimerizacije). Količina DNA sintetiziran je identificiran pomoću ELISA ili elektroforezom.
PCR se može koristiti u različitim biološkom materijalu - seruma ili krvne plazme, struganje uretre, biopsije, pleuralni tekućine, cerebrospinalna tekućina, itd Prvi PCR je korištena za dijagnozu bolesti poput virusni hepatitis B, hepatitis C virusne, virusnog hepatitisa D, CMV infekcije, spolno prenosive infekcije infektivnim (gonoreje, smeće diynaya, mikoplazme, ureaplazma infekcije), tuberkuloza, HIV -infektsiya itd
Prednost PCR-a u dijagnostici zaraznih bolesti u odnosu na druge metode istraživanja je kako slijedi:
- uzročnik infekcije može se naći u bilo kojem biološkom okruženju tijela, uključujući i materijal dobiven biopsijom;
- Moguće je dijagnosticirati zarazne bolesti u najranijim fazama bolesti;
- Moguće je kvantitativno vrednovanje rezultata istraživanja (koliko se virusa ili bakterija nalazi u istraživanom materijalu);
- visoka osjetljivost metode; npr osjetljivost PCR za detekciju DNA virusa hepatitisa B u krvi je 0,001 pg / ml (približno 4 x 10 2 kopija / ml), a osjetljivost metode DNA hibridizacije koristeći razgranate proba - 2.1 pg / mL (približno 7 × 10 5 kopija / ml).
[