PCR hepatitisa C

HCV u materijalu obično nema.

Za razliku od serološkoj dijagnozi hepatitis C virusne postupke gdje otkrivaju antitijela za HCV, PCR može otkriti prisutnost HCV RNA i izravno kvantificirati svoju koncentraciju u materijalu. Test ima specifičnu specifičnost i visoku osjetljivost: deset HCV RNA molekula u ispitnom materijalu dovoljno je za njegovo otkrivanje. Detekcija antitijela na HCV samo potvrđuje činjenicu zaraženi pacijent, ali ne dopušta procijeniti aktivnost infektivnog procesa (replikacije virusa) i prognozu bolesti. Osim toga, antitijela na HCV otkriti u krvi bolesnika s akutnim i kroničnim hepatitisom, kao i na one pacijente koji su bolesni i oporavio, ali često protutijela pojavljuju se u krvi samo nekoliko mjeseci nakon početka kliničke bolesti, što je teško dijagnosticirati. Detekcija HCV u krvi pomoću PCR je više informativna dijagnostička metoda. Identifikacija HCV RNA s PCR dokaz viremije, daje naznaku replikacije virusa u tijelu, te je jedan od kriterija za učinkovitosti antivirusnu terapiju. Otkrivanje HCV RNA pomoću PCR u ranim stadijima razvoja virusne infekcije u pozadini potpune odsutnosti bilo kojeg seroloških markera može poslužiti kao najstariji dokaz infekcije. Međutim, izolirana detekcija HCV RNA u pozadini potpune odsutnosti drugih seroloških markera ne može u potpunosti eliminirati lažno pozitivan rezultat PCR-a. U takvim slučajevima, sveobuhvatna procjena kliničke, biokemijske i morfološke studije s ponovljenim ponavlja PCR potvrdu o prisutnosti infekcije.

Od velike je važnosti korištenje PCR metode u bolesnika s kroničnim virusnim hepatitisom C, jer u većini njih nema korelacije između prisutnosti virusne replikacije i aktivnosti jetrenih enzima. U takvim slučajevima, samo PCR omogućuje procjenu prisutnosti virusne replikacije, pogotovo ako se krajnji rezultat izražava kvantitativno. U većini slučajeva nestanak HCV RNA iz krvnog seruma pojavljuje se kasnije nego normalizacija jetrenih enzima pa njihova normalizacija ne može poslužiti kao osnova za zaustavljanje antivirusnog liječenja.

Za otkrivanje HCV RNA je praktički važno istražiti PCR metodom ne samo serumom, već i limfocitima, hepatobiobaptamom. Virusi se mogu otkriti 2-3 puta češće u tkivu jetre nego u serumu. Prilikom procjene rezultata ispitivanja krvnog seruma za HCV RNA treba imati na umu da viremija može varirati u prirodi (kao što je promjena enzimske aktivnosti). Stoga, nakon pozitivnih rezultata PCR studije, može se dobiti negativan rezultat i obrnuto. U takvim slučajevima, kako bi se riješile sumnje koje se javljaju, bolje je istražiti hepatobibaze.

Otkrivanje HCV RNA u materijalu korištenjem PCR koristi se za sljedeće svrhe:

• rješavanje upitnih rezultata seroloških istraživanja;
• diferencijacija virusnog hepatitisa C iz drugih oblika hepatitisa;
• otkrivanje akutne faze bolesti u usporedbi s prenesenom infekcijom ili kontaktom; stupanj infekcije novorođenčadi iz seropozitivnih HCV majki;
• praćenje učinkovitosti antivirusnog liječenja.

Pacijenti s sumnjom na virusni hepatitis C:

• donora;
• osobe s čimbenicima rizika;
• osobe s povećanom aktivnošću ALT-a;
• bolesnika s akutnim hepatitisom

Sve gore navedene značajke evaluacije rezultata i pristupa dijagnozi HCV pomoću PCR također se primjenjuju na druge infekcije.

PCR metoda omogućuje ne samo otkrivanje HCV RNA u ispitivanom materijalu, već i uspostavljanje njegovog genotipa. Određivanje genotipa virusa od velike je važnosti za odabir bolesnika s kroničnim virusnim hepatitisom C za liječenje interferonom alfa i ribavirinom. Laboratorijske indikacije za liječenje kroničnog virusnog hepatitisa C s interferonom alfa su kako slijedi:

• povećana aktivnost transaminaze;
• prisutnost HCV RNA u krvi;
• genotip 1 HCV;
• visoka viremija u krvi (više od 8 × 10 ⁵ kopija / ml).

Trenutačno, sadržaj HCV RNA u krvnom serumu može se kvantitirati pomoću PCR, što je od velike važnosti za kontrolu interferon alfa tretmana. Razine viremija procijenjena kako slijedi: sadržaj HCV RNA od 10 ² 10 ⁴ kopija / ml - slab; od 10 ⁵ do 10 ⁷ kopija / ml - medij, iznad 10 ⁸ kopija / ml - visok. S učinkovitim liječenjem razina viremije smanjuje.

[1], [2], [3], [4]