Sauzern-blotting
Posljednji pregledao: 23.04.2024
Svi iLive sadržaji medicinski se pregledavaju ili provjeravaju kako bi se osigurala što je moguće točnija činjenica.
Imamo stroge smjernice za pronalaženje izvora i samo povezujemo s uglednim medijskim stranicama, akademskim istraživačkim institucijama i, kad god je to moguće, medicinski pregledanim studijama. Imajte na umu da su brojevi u zagradama ([1], [2], itd.) Poveznice koje se mogu kliknuti na ove studije.
Ako smatrate da je bilo koji od naših sadržaja netočan, zastario ili na neki drugi način upitan, odaberite ga i pritisnite Ctrl + Enter.
Southern blotting (razvijen od strane E. Southern i R. Davies 1975) je glavna metoda pomoću kojeg se identificiraju geni određene bolesti. Zbog toga se DNA iz pacijentovih stanica ekstrahira i obrađuje s jednom od restrikcijskih endonukleaza (ili više njih). Rezultirajući fragmenti podvrgavaju se elektroforezi, što im omogućuje da budu veličine veličine (manji fragmenti se kreću brže kroz pore u gelu). Tada se fragmenti prenesu (otisnuti) na nitrocelulozni filtar, na koji je složena radio-obilježena sonda. Sonda se veže samo na komplementarnu sekvencu. Zatim, metodom autoradiografije, određuje se položaj željenog fragmenta genomske DNA na elektroforemramu.
Hibridizacije s označenim DNA probe s RNA ili DNA pripravcima drip nanesena krutoj matrici, bez prethodnog ograničenja i elektroforezom naziva Dot i utor hibridizacije ovisi o konfiguraciji DNA mjesta na filteru (okrugli ili izduženi, respektivno).