Infektivna mononukleoza: antitijela na Epstein-Barr virus u krvi

Inficijska mononukleoza je zajednička sistemska limfoproliferativna bolest, najčešće uzrokovana virusom Epstein-Barr. Toxoplasma gondii i drugi virusi (CMV, virus humane imunodeficijencije i humani herpesvirus tip 6, koji je prepoznat kao uzrok iznenadne eksantheme) mogu uzrokovati klinički slične bolesti. Ovi isti etiološki agensi su vjerojatno sposobni uzrokovati razvoj sindroma kroničnog umora.

Epstein-Barr virus je virus iz herpes grupe, ima tropizam za B-limfocite, dugo ostaje u stanicama domaćina kao latentna infekcija. On je široko rasprostranjen diljem svijeta. Struktura i veličina, Epstein-Barr virus se ne razlikuje od drugih herpesvirusa, ali se značajno razlikuje od njih u antigenskim svojstvima. Virus ima membranski antigen (MA-membranski antigen), nuklearni antigen (EBNA-Epstein-Barris nukleinski antigen) i virusni kapsidni antigen (VCA).

Infekcija se javlja kada se virus prenosi sa sline. Epstein-Barrov virus, kada se proguta inficira ždrijela epitela, što uzrokuje upalu i povišenu temperaturu - tipični klinički znakovi počeo infektivne mononukleoze. Strogo limfotropični virus, spajanje S3α staničnu membranu receptor B-limfocita inducira proliferaciju poliklonalnim B-limfocitima s odgovarajućim povećanjem krajnika, sistemski limfodenopatijom i slezene. B-limfociti su transformirane (steknu sposobnost da beskonačni podjele), te u odsutnosti odgovarajućeg imunosnog odgovora, ovaj postupak se može razviti očito maligna (npr X-vezana limfoproliferativna sindrom). Ako stanični imunitet faktori kontroliraju replikaciju virusa Epstein-Barr virus u tijelu, klinički simptomi infektivne mononukleoze postupno nestaju.

Kao i drugih herpesvirusa, Epstein-Barrov virus može zadržati u latentne infekcije (njezina DNA koji se nalazi u jezgri male količine B-limfocita). Epizodno asimptomatski reaktivacija infekcije - čest fenomen, oko 20% zdravih mladih ljudi izlučuju virus Epstein-Barr virus slinom. Kod osoba s oštećenom stanični imunitet (npr AIDS, ataksija telangiektazija-u presađenim) mogu razviti jasnu reaktivnu infekciju s dlakava leukoplakija, intersticijski pneumonitis, ili u obliku limfoma monoklonskih B-stanica. Sa Epstein-Barr virus povezan etiologiju nazofarinksa karcinom i Burkittov limfom.

Jedna od manifestacija zarazne mononukleoze je pojava u perifernoj krvi atipičnih limfocita (do 10% od ukupnog broja limfocita). Atipični limfociti se nalaze u krvi od početka razdoblja kliničkih manifestacija infekcije. Njihov sadržaj u krvi doseže vrhunac na kraju drugog ili početkom trećeg tjedna i može se držati na ovoj razini do 1,5-2 mjeseca, potpuni nestanak obično se javlja do početka 4. Mjeseca od pojave bolesti. Prisutnost atipičnih limfocita je relativno neosjetljiv znak infekcije uzrokovane Epstein-Barr virusom, ali ima ukupnu specifičnost od oko 95%.

Proliferacija poliklonalnim B-limfocitima u infekcije uzrokovane Epstein-Barr virus, stvara veliku raznolikost autoantitijela u pacijentu, kao što su IgM anti--i (hladnom aglutininom), reumatoidni faktor, antinuklearna antitijela. Većina neobičnih Igs koji se pojavljuju u infektivnoj mononukleozi nazivaju se Paul-Bunnel heterofilna protutijela. Ta antitijela pripadaju klasi IgM, što ima afinitet za janje i konjske crvenih krvnih stanica, a ne odnosi se na bilo koji antigen Epstein-Barr virus. Heterophilic antitijela - Random proizvodi B-limfnog proliferacije (uzrokovana Epstein-Barr virus), pojavljuju se u prvom tjednu infektivne mononukleoze i postupno nestaju tijekom oporavka, oni se obično ne otkrije u 3-6 mjeseci.

Kako početna akutna faza infekcije postaje latentna, genomi Epstein-Barr virusa (jedinstveni antigeni) pojavljuju se velikim brojem u svim stanicama, a nuklearni antigen se oslobađa u okoliš. Kao odgovor na antigen, sintetizirani su specifična antitijela - vrijedni biljezi bolesti. Nedugo nakon infekcije limfocita B, otkriven je rani antigen (EA), protein potreban za replikaciju Epstein-Barr virusa (a ne strukturalne virusne komponente). Za ranog antigena u pacijentovom tijelu, sintetizirani su protutijela klasa IgM i IgG. Zajedno s punim virusom Epstein-Barr virusa pojavljuju se antigeni virusnog kapsida (VCA) i membranskog antigena (MA). Kako infekcija smirila mali postotak zaraženih virusom, Epstein-Barr virus u limfocita imunološkog izbjegava degradaciju i održava virusni genom u latentnom obliku. Nuklearni antigen (EBNA) Epstein-Barr virusa je odgovoran za dupliciranje i preživljavanje.

Laboratorijska ispitivanja mogu otkriti antitijela na različite antigene.

Od seroloških metoda dijagnosticiranja infektivne mononukleoze najčešća je reakcija Paul-Bunnel (aglutinacija), koja ima za cilj otkrivanje heterofilnih protutijela u serumu. Titar heterofilnih protutijela 1: 224 i više u serumu pacijenta prepoznat je kao dijagnostički značajan, potvrđujući dijagnozu zarazne mononukleoze. Heterofilna aglutinacija je pozitivna u 60% mladih nakon 2 tjedna i 90% nakon 4 tjedna od pojave kliničkih manifestacija bolesti. Stoga je potrebno nekoliko studija za dijagnosticiranje infektivne mononukleoze: tijekom prvog tjedna bolesti (reakcija može biti negativna) i 1-2 tjedna kasnije (reakcija može postati pozitivna). Sadržaj heterofilnih antitijela se smanjuje nakon završetka akutnog perioda infektivnog procesa, ali njihov titar se može odrediti u roku od 9 mjeseci od pojave kliničkih simptoma. Paul-Bunnelova reakcija može se preokrenuti od pozitivnih do negativnih, čak i na pozadini preostalih hematoloških i kliničkih simptoma u pacijenta. Osjetljivost metode u odraslih je 98%, specifičnost je 99%. U djece s infektivne mononukleoze u dobi od 2 godine heterophilic antitijela su otkrivena je samo u 30% pacijenata u dobi 2-4 godine - 75%, više od 4 godine - više od 90%. Osjetljivost metode u djece je manja od 70%, specifičnost je 20%. Reduciran, te je ponovno povećava titar antitijela heterophile se javljaju kao odgovor na druge infekcije (većina gornjih dišnih virusne infekcije). Odgovor Paul-Bunnel nije specifičan za Epstein-Barr virus. Titar heterofilnih protutijela ne daje križnu reakciju i ne korelira s specifičnim antitijelima na Epstein-Barr virus, niti korelira s ozbiljnošću bolesti. Test je beskoristan za dijagnosticiranje kroničnog oblika zarazne mononukleoze (pozitivno u prosjeku samo u 10% pacijenata).

Titri 1:56 ili manje mogu se naći u zdravih ljudi i kod pacijenata s drugim bolestima (reumatoidni artritis, rubeola). Lažno pozitivni rezultati ispitivanja vrlo su rijetki.

Trenutno, za detekciju antitijela na eritrocitima ovce pomoću metoda „jednom mjestu” (klizač aglutinacije), u početku se koristi kao test probira. Osjetljivost je usporediva s Paul-Bunnel reakcijom. Klizni lažni pozitivni testovi mogu biti oko 2% (studija leukemije, malignog limfoma, malarije, rubeole, virusni hepatitis, karcinoma gušterače) i lažno negativnih odraslih - 5-7% slučajeva.

Valja napomenuti da je spektar dijagnostičkih testnih sustava koji proizvode tvrtke temeljem određivanja titra antitijela vrlo širok, stoga je potrebno usredotočiti se na dijagnostički titar protutijela navedenih u uputama za ispitne sustave.

Ako heterophile antitijela nisu identificirani, a klinička slika odgovara infektivne mononukleoze, potrebno je ispitati seruma za specifična protutijela IgM i IgG. Za otkrivanje specifičnih protutijela za Epstein-Barr virus pomoću neizravne metode imunofluorescentna (omogućuju otkrivanje protutijela na VCA i EA antigene) antialexin-imunofluorescencije (otkrivanje protutijela, EA VCA i EBNA antigen) i IFA.

Antitijela na EA antigen D komponentu (anti-EA-D) pojavljuju se čak iu latentnom razdoblju primarne infekcije i brzo nestaju s oporavkom.

Protutijela na komponentu EA antigena R (anti-EA-R) mogu se otkriti 3-4 tjedna nakon kliničkih manifestacija bolesti. Oni traju oko godinu dana u krvnom serumu, često otkriveni s atipičnim ili dugotrajnim strujama zarazne mononukleoze. Obično se ta antitijela nalaze s Burkittovim limfomom.

Protutijela na VCA klasa IgM (anti-VCA IgM) pojavljuju se vrlo rano, obično na kliničke simptome, otkriveni su na početku bolesti u 100% slučajeva. Visoki titri pojavljuju se u 1-6. Tjednu od početka infekcije, počnu padati od 3. Tjedna i obično nestaju nakon 1-6 mjeseci. Anti-IgM VCA gotovo su uvijek prisutne u serumu s aktivne infekcije, pa je metoda za detekciju je vrlo osjetljiv i specifičan, akutne epizode infektivne mononukleoze.

Protutijela na VCA klase IgG (anti-VCA IgG) mogu se pojaviti rano (u 1-4 tjednu), njihova količina doseže vrhunac do 2. Mjeseca bolesti. Na početku bolesti nalaze se u 100% slučajeva. Samo 20% pacijenata pokazalo je 4-struko povećanje titra u proučavanju uparenih seruma. Titar se smanjuje nakon oporavka, ali se nalazi u roku od nekoliko godina nakon prenešene infekcije, stoga je beskorisno za dijagnozu zarazne mononukleoze. Prisutnost anti-VCA IgG ukazuje na stanje nakon infekcije i imuniteta.

Protutijela na EBNA (anti-EBNA) pojavljuju se kasnije od svih, rijetko su prisutni u akutnoj fazi bolesti. Njihov se sadržaj povećava tijekom razdoblja oporavka (u roku od 3-12 mjeseci), mogu trajati mnogo godina nakon bolesti. Nedostatak anti-EBNA u prisutnosti anti-VCA IgM i anti-EA IgM ukazuje na trenutnu infekciju. Detekcija anti-EBNA nakon prethodno negativne reakcije ukazuje na postojeću infekciju. Kada se koristi ELISA metodom, moguće je istovremeno otkriti prisutnost anti-EBNA klasa IgM i IgG. Ako je količina anti-EBNA IgM veća od anti-EBNA IgG, treba uzeti u obzir akutnu infekciju, pri čemu je obrnuti odnos prethodni.

U korist akutne primarne infekcije, jedan ili više sljedećih simptoma ukazuju na prisutnost:

• anti-VCA IgG (otkriven rano, a kasnije se sadržaj smanjuje);
• Visoki titar (više od 1: 320) ili 4-struko povećanje titra anti-VCA IgG tijekom bolesti;
• prolazni porast titra anti-EA-D (1:10 ili više);
• rani anti-VCA IgG bez anti-EBNA, a kasnije - pojava anti-EBNA.

Akutna ili primarne infekcije uzrokovane Epstein-Barr virus, isključeni ukoliko titri anti-VCA IgG anti-EBNA u serumu se ne mijenja tijekom vremena studije (u akutnoj fazi i oporavak).

Stalna prisutnost ranog antigena i anti-VCA IgG u visokim titrima ukazuje na kroničnu fazu infekcije.

Detekcija protutijela na Epstein-Barr virus koristi se za dijagnosticiranje infektivne mononukleoze i kroničnih infekcija izazvanih Epstein-Barr virusom.

Antitijela na Epstein-Barr virus se može detektirati na sljedeće bolesti: sekundarne imunodeficijencije, uključujući HIV infekcije, nazofaringealni karcinom, Burkittov limfom, CMV infekcija, sifilis, Lyme bolest, bruceloze, i drugi.

[1], [2], [3], [4], [5], [6], [7]