Mikrobiološki pregled sputuma

Mikrobiološki pregled najvažnija je karika u dijagnostičkom traženju i provjeri uzročnika upale pluća. Uključuje ne samo izolaciju uzročnika, već i proučavanje njegovih svojstava, uključujući osjetljivost na različite lijekove s baktericidnim i bakteriostatskim djelovanjem.

U tu svrhu koristi se metoda sjetve sputuma na različite hranjive podloge. U uzorku sputuma dostavljenom u laboratorij odabiru se gnojne grudice i pažljivo isperu u Petrijevoj zdjelici izotopskom otopinom natrijevog klorida, što do određene mjere omogućuje njihovo oslobađanje od mikroflore gornjih dišnih putova. Sjetva gnojnih grudica sputuma provodi se na različite hranjive podloge, čiji je sastav opisan u posebnim priručnicima o mikrobiologiji. Podloge s sjemenkama inkubiraju se na 37,5 °C tijekom 24 sata. Iz uzgojenih kolonija izoliraju se čiste kulture, identificiraju se poznatim mikrobiološkim metodama i određuje se njihova osjetljivost na antibiotike.

Za određivanje kvantitativnog sadržaja mikroorganizama, sputum se homogenizira, pomiješa s hranjivim temeljcem i od smjese se pripremaju uzastopna desetostruka razrjeđenja koja se inokuliraju na Petrijeve zdjelice s krvnim agarom. Nakon 24 sata inkubacije na 37,5°C, rezultati se uzimaju u obzir, brojeći kolonije istog tipa po izgledu i uzimajući u obzir stupanj razrjeđenja materijala. Iz kolonija se pripremaju razmazi i pregledavaju pod mikroskopom.

Interpretacija rezultata

Interpretacija rezultata mikrobiološkog pregleda sputuma prilično je složena, što se objašnjava nizom čimbenika. Već je gore spomenuto stalno presijavanje bronhijalnog sadržaja mikroflorom gornjih dišnih putova i usne šupljine te česta prisutnost u normalnom traheobronhijalnom sadržaju zdravih ljudi većine najtipičnijih uzročnika respiratornih bolesti (pneumokoka, streptokoka, stafilokoka itd.). U tom smislu, izolacija u sputumu tijekom mikrobioloških studija asocijacije različitih mikroorganizama, od kojih je većina u ovom konkretnom slučaju oportunistička, izuzetno otežava utvrđivanje uzročnika bolesti. Stoga je za tumačenje rezultata mikrobiološkog pregleda sputuma potrebno uzeti u obzir kvantitativnu prevlast određene vrste bakterija (više od 10 ⁶ -10 ⁷ mc/ml), pojavu određenih mikroorganizama u fazi pogoršanja i njihov nestanak tijekom razdoblja remisije. Vrlo je važno uzeti u obzir kliničku sliku bolesti.

Glavni i mogući uzročnici različitih kliničkih oblika upale pluća

Klinički oblik pneumonije	Glavni patogeni	Mogući patogeni
Krupus	Pneumokoki	Streptokoke, Klebsiella
Nakon gripe	Stafilokoki, pneumokoki, klebsiella	Haemophilus influenzae, streptokoki
Abscesiranje	Stafilokoki, bakteroidi, miješana flora	Klebsiella, Pseudomonas aeruginosa
Aspiracija	Bakteroidi, anaerobni streptokoki	Stafilokoki, pneumokoki
Postoperativno	Stafilokoki	Pneumokoki, Klebsiella
Međuprostorni	Mikoplazme	Uzročnici ornitoze i psitakoze
Sekundarna pneumonija kod hospitaliziranih pacijenata bez prethodne antibakterijske terapije	Stafilokoki, pneumokoki, klebsiella, bakteroidi	Escherichia coli, serratia itd.
Sekundarna pneumonija razvijena na pozadini antibakterijske terapije	Fakultativni patogeni mikroorganizmi	Pseudomonas, Serratia, Klebsiella, Staphylococcus, Proteus itd.
Kod pacijenata s kroničnim bronhitisom	Pneumokok, Haemophilus influenzae	Stafilokoki, streptokoki
Kod pacijenata s alkoholizmom	Pneumokoki, Haemophilus influenzae, Klebsiella	E. coli, protozoe
Kod sindroma stečene imunodeficijencije	Pneumocystis, gljivice	Citomegalovirusi
Kod pacijenata čiju njegu pružaju vanjske osobe	Pneumokoki, stafilokoki, hemofilna papila	Klebsiella, Escherichia coli

Prilikom kvantitativne procjene rezultata studije mikrobne kontaminacije kod pacijenata s upalom pluća, potrebno je imati na umu izuzetno visoku osjetljivost ovog pokazatelja na propisivanje antibiotika. Čak i kratkotrajno liječenje antibakterijskim lijekovima može dovesti do naglog smanjenja mikrobne kontaminacije, što ne omogućuje adekvatnu procjenu rezultata studije sputuma. Stoga je preporučljivo prikupiti sputum prije propisivanja antibiotskog liječenja.

Također treba napomenuti da se za uzgoj unutarstaničnih uzročnika upale pluća (mikoplazma, legionela, klamidija, rikecije) koriste posebni selektivni hranjivi mediji. Rutinsko mikrobiološko testiranje korištenjem konvencionalnih hranjivih medija (agar-agar) nikada ne daje pozitivne rezultate. Stoga bi odabir specifičnih metoda mikrobiološkog testiranja trebao biti proveden uz sudjelovanje liječnika koji je dužan obavijestiti laboratorijskog liječnika o svojim sumnjama u vezi s mogućom ulogom unutarstaničnih uzročnika u nastanku upale pluća kod ovog pacijenta.

Treba dodati da u stvarnoj kliničkoj praksi čak i tehnički savršen mikrobiološki pregled sputuma omogućuje identifikaciju patogena u ne više od 40-60% slučajeva. Stoga se za provjeru patogena mogu koristiti i druge moderne metode istraživanja. Informativni sadržaj bakteriološke studije može se značajno povećati korištenjem traheobronhijalnog aspirata, tekućine dobivene tijekom bronhoalveolarne lavaže (BAL), bronhoskopije itd., umjesto sputuma, kao biološkog materijala koji se proučava.

Osim toga, za identifikaciju uzročnika upale pluća mogu se koristiti metoda imunofluorescencije različitih bioloških materijala (bronhoskopski materijal, krv, pleuralni sadržaj itd.), PCR dijagnostičke metode i proučavanje razine specifičnih antitijela u krvnom serumu. Nažalost, ove dijagnostičke metode još nisu pronašle široku kliničku primjenu i trenutno se koriste samo u velikim specijaliziranim centrima i laboratorijima.

[ 1 ], [ 2 ], [ 3 ], [ 4 ], [ 5 ], [ 6 ], [ 7 ]