Mikroskopska analiza sputuma

Mikroskopska promatranje domaćih i fiksnih obojenih iskašljaja primjeraka omogućuje detaljan pregled njegove celularne strukture, te u određenoj mjeri odražava prirodu patoloških procesa u plućima i bronhija, njegove aktivnosti, identificirati različite vlaknastu i kristalne formacije, također imaju važnu dijagnostičku vrijednost, a na kraju grubo procijeniti stanje mikrobiološka flora respiratornog trakta (bakterioskopija).

Na mikroskopiji koristite nativne i oslikane preparate sputuma. Za proučavanje mikrobnu floru (razmaza) sputuma razmaza obično obojeni Romanovsky-Giemsa, Gram, i za otkrivanje Mycobacterium tuberculosis, ali Ziehl-Nielsen.

Stanični elementi i elastična vlakna

Od staničnih elemenata koji se mogu otkriti u ispljuvak bolesnika s pneumonijom, epitelne stanice, alveolarni makrofagi, leukociti i eritrociti dijagnostički su važni.

Epitelne stanice. Pločastog epitela nema iz usta, ždrijela, glasnica i dijagnostičke vrijednosti Epiglotis, iako je otkrivanje velikog broja skvamozne stanice, obično ukazuje na nisku uzorak kvaliteta sputum dostaviti u laboratorij i sline koja sadrži znatnu nečistoću.

U bolesnika s upalom pluća sputum se smatra prikladnim za istraživanje ako mikroskopijom s malim porastom broj epitelnih stanica ne prelazi 10 u vidnom polju. Veći broj epitelnih stanica ukazuje na neprihvatljivu predominost u biološkom uzorku sadržaja orofaringealnog sustava.

Alveolarni makrofagi, koji se u malim količinama mogu naći iu bilo kakvom sputumu, jesu velike stanice retikulohistocitnog podrijetla s ekscentrično lociranom velikom jezgrom i obilnim inkluzijama u citoplazmi. Ove inkluzije mogu se sastojati od sitnih čestica prašine (stanice prašine), leukocita i slično koje se apsorbiraju makrofage. Broj alveolarnih makrofaga raste s upalnim procesima u plućnoj parenhima i dišnim putevima, uključujući upalu pluća.

Stanice valjkasti trepljastim epitel sluznicu grkljana, traheje i bronhija. Izgledaju kao izdužene stanice, proširene na jednom kraju, gdje se nalaze jezgra i cilijada. Stanice epitela cilindrični prekriven cilijama naći u bilo ispljuvak, ali je njihov rast označava oštećenja bronhijalne sluznice i dušnik (akutni i kronični bronhitis, bronhiektazija, traheitis, laringitisa).

Leukociti u malim količinama (2-5 u vidnom polju) nalaze se u bilo kojem sputumu. Kada se upala pluća tkiva ili bronhijalna sluznica i traheja, pogotovo kada se gubica (gangrena, plućni apsces, bronhiectaza) značajno povećava njihov broj.

Kod bojenja sputvenih pripravaka prema Romanovsky-Giemsa, moguće je razlikovati pojedine leukocite, koji ponekad imaju važnu dijagnostičku vrijednost. Tako, kada je eksprimiran upalu pluća ili bronhijalne sluznice povećava tkiva kao i ukupan broj neutrofila i broja degenerativnih oblika fragmentacije jezgre, i uništenje citoplazmi.

Povećanje broja degenerativnih oblika leukocita je najvažniji znak aktivnosti upalnog procesa i teže tijeka bolesti.

Eritrociti. Pojedinačni eritrociti mogu se praktički detektirati i bilo koji sputum. Značajno povećanje se opaža kada je vaskularna permeabilnost smanjena u bolesnika s upalom pluća, uz uništavanje pluća ili bronhijalnog tkiva, stagnaciju u malom krugu cirkulacije, infarktom pluća itd. U velikom broju crvenih krvnih zrnaca u ispljuvaju se nalaze tijekom hemoptije bilo koje geneze.

Elastična vlakna. Spomenuti bi također trebali biti oko drugog člana iskašljaja plastičnih vlakana koji se pojavljuju u ispljuvak u uništenje plućnog tkiva (pluća apsces, tuberkuloza, rak pluća razgrađuje i dr.). Elastična vlakna su prikazana u ispljuvak u obliku tankih dvotračnih, crimped filament s dichotomous podjela na krajevima. Pojava elastičnih vlakana u ispljuvak u bolesnika s teškom upalom pluća pokazuje pojavu jedne od komplikacija bolesti - apscesa plućnog tkiva. U nekim slučajevima, u stvaranju apscesa pluća, elastična vlakna u ispljuvaju se mogu otkriti čak i malo ranije od odgovarajućih radioloških promjena.

Često, s croupovom upalom pluća, tuberkulozom, aktinomikozom, fibrinskim bronhitikom u sputum preparatima, mogu se otkriti tanke fibrinske vlakna.

Znakovi aktivnog upalnog procesa u plućima su:

1. priroda sputuma (mucopurulent ili purulent);
2. povećanje broja neutrofila u ispljuvaju, uključujući njihove degenerativne oblike;
3. povećanje broja alveolarnih makrofaga (iz pojedinačnih nakupina nekoliko stanica u vidnom polju i više);

Pojava u ispljuvku elastičnih vlakana ukazuje na uništavanje plućnog tkiva i stvaranje apscesa pluća.

Konačni zaključci o prisutnosti i stupnju aktivnosti upale i uništavanja plućnog tkiva nastaju samo kad se uspoređuju s kliničkom slikom bolesti i rezultatima drugih laboratorijskih i instrumentalnih metoda ispitivanja.

[1], [2], [3], [4], [5]

Mikrobiološka flora

Probirna mikroskopija, bojana prema gramu, i proučavanje mikrobiološke flore (bakterioskopija) u dijelu pacijenata s upalom pluća omogućuje preliminarno utvrđivanje najvjerojatnije uzročnika plućne infekcije. Ova jednostavna metoda ekspresijske dijagnostike patogena nije dovoljno točna i treba se koristiti samo u kombinaciji s drugim (mikrobiološkim, imunološkim) metodama sputuma. Ugljen mikroskopije mrlje na mrljama ponekad je vrlo korisno za hitne selekcije i primjenu adekvatne terapije antibioticima. Međutim, valja imati na umu mogućnost kontaminacije bronhalnog sadržaja mikroflore gornjeg dišnog trakta i usne šupljine, naročito kada se nepropisno sakuplja sputanje.

Zbog toga se ispljuvak smatra pogodnim za daljnju istragu (bakterioskopija i mikrobiološki pregled) samo ako ispunjava sljedeće uvjete:

• Gram bojenje u ispljuvima otkriva veliki broj neutrofila (više od 25 u vidnom polju s malim povećanjem mikroskopa);
• Broj epitelnih stanica, više karakterističan za sadržaj orofarinksa, ne prelazi 10;
• u pripremi je prevladavanje mikroorganizama istog morfološkog tipa.

Na Gram mrlje pljuvačke u razmazu ponekad biti dovoljno za identifikaciju gram pneumokoka, streptokoka, stafilokoki i gram-negativne bakterije grupu dobro. - Klebsiellu, štapić Pfeiffer, E. Coli i drugih Gram-pozitivnih bakterija U tom slučaju postao plav, i Gram - crveno.

Bakterijski patogeni upale pluća

Gram-pozitivna	Gram
Pneumococcus Streptococcus pneumoniae. Streptococcus pyogenes, Streptococcus viridans. Staphylococcus aureus, Staphylococcus haemolyticus.	Klebsiella  (Klebsiella pneumoniae) Hemophilus influenzae (Pfeiffer) Haemophilius influenzae Pseudomonas aeruginosa  (Pseudomonas aeruginosa) Legionnella (Legionella Pneumophilia) E. Coli (Escherichia coli)

Pre ispljuvak premazati je najlakši način pneumonije provjere patogena i ima određen vrijednost za izbor optimalnog antibiotske terapije. Na primjer, kada je detektiran mrlje obojene gram, grompolozhitelnyh diplococci (pneumokoki) ili stafilokoki umjesto antibiotika širokog spektra, koji povećavaju rizik od selekcije i širenje mikroorganizama aitibiotikorezistentnyh moguće odrediti ciljane terapije, aktivna protiv stafilokoka, ili pneumokoka. U drugim slučajevima, otkrivanje dominantnih flore u Gram brisa može ukazivati pas koji uzrokuje upalu pluća Enterobacteriaceae su gram-negativne (Klebsiella, E. Coli, itd), što zahtijeva odgovarajuće odredište ciljanu terapiju.

Međutim, uvjetno zaključak vjerojatno uzročnika upale pluća mikroskopom je moguće samo na temelju PAS značajan porast bakterija u ispljuvak, u koncentraciji 10 ^C6 - od 10 ^{: 7}  mikrobnih stanica / ml ili više (LL Vishnjakova). Niska koncentracija mikroorganizama (<10 ³  m.ks / ml) karakteristična je za prateću mikroflora. Ako je koncentracija stanica mikroba u rasponu od 10 ⁴  10 ⁶  mikrobnih stanica / ml, to ne isključuje etiološku ulogu tog mikroorganizma u pojave plućne infekcije, ali to ne dokazati.

Treba također imati na umu da "atipični" intracelularni patogeni (mikoplazma,  legionella, klamidija, rickettsia) ne mrlje Gramm. U takvim slučajevima, sumnja da postoji "atipična" infekcija može se pojaviti ako razmaz pokazuje disocijaciju između velikog broja neutrofila i izuzetno malog broja mikrobnih stanica.

Nažalost, postupak karakterizira mikroskopijom i općenito vrlo male osjetljivosti i specifičnosti. Ne prediktivna vrijednost čak i protiv pneumokoki dobro izvedena su jedva doseže 50%. To znači da je pola metoda daje lažno pozitivne rezultate. To je zbog nekoliko razloga, od kojih je jedan i činjenica da oko 1/3 bolesnika prije hospitalizacije dobila antibiotike, što uvelike smanjuje učinkovitost sputuma razmazu. Nadalje, čak i u slučaju pozitivnih rezultata studije, što ukazuje na dovoljno visoku koncentraciju u testu „tipične” bakterijskih patogena (npr pneumokokalni), ne može u potpunosti isključuje prisutnost koinfekcija „atipični” intracelularne patogene (mikoplazma, Chlamydia, Legionella).

Metoda bakterioskopije krvarenja sputuma, obojenih Gram-om, u nekim slučajevima pomaže u potvrđivanju uzročnika pneumonije, iako općenito ima vrlo nisku prediktivnu vrijednost. Atipični intracelularni patogeni (mycoplasma, legionella, klamidija, rickettsia) uopće nisu potvrđeni metodom bakterioskopije, jer ne mrlje Gramm.

Treba spomenuti mogućnost mikroskopske dijagnoze u bolesnika s pneumonijom gljivične infekcije pluća. Najrelevantniji za pacijente koji primaju dugotrajno liječenje s antibioticima širokog spektra, je detekcija nativni ili mikroskopijom u obojeni sputuma Candida albicans u obliku stanica kvasca i grananje micelija. Oni ukazuju na promjenu mikroflore traheobronhijalnih sadržaja, koja se javlja pod utjecajem antibiotskog liječenja, što zahtijeva znatnu korekciju terapije.

U nekim slučajevima kod pacijenata s upalom pluća postoji potreba za razlikovanjem postojeće plućne bolesti tuberkulozom. U tu svrhu, koristite boju razmaz Ziehl-Nielsen, koja u nekim slučajevima dopušta identifikaciju Mycobacterium tuberculosis, ali negativan rezultat takve istrage ne znači nedostatak pacijenata TB. Kada mrlja sputuma prema Tsil-Nielsenu, mycobacterium tuberculosis je obojena crvenom, a svi ostali sputumi su plavi. Tuberkulozni mikobakterije imaju izgled izmeta, ravnih ili blago zakrivljenih štapića različitih duljina s odvojenim zgušnjavanjem. Nalaze se u pripremi u skupinama ili pojedinačno. Dijagnostička vrijednost je detekcija u pripremi čak i pojedinačnih mikobakterija tuberkuloze.

Za povećanje učinkovitosti mikroskopske detekcije mikobakterija tuberkuloze koristite niz dodatnih metoda. Najčešće od tih je tzv plutanje metoda, u kojoj se homogenizira sputum mućka s toluen, ksilen ili benzen, koji pada, na površinu, hvatanje mikobakterije. Nakon taloženja sputuma, gornji se sloj pipetira na slajd. Onda je lijek fiksiran i zamrljan od strane Tsilyu-Nielsena. Postoje i druge metode skladištenja (elektroforeza) i tuberkuloze bakterija mikroskopije (fluorescentna mikroskopija).

Mikroskopski pregled (analiza) sputuma može otkriti sluz, stanične elemente, vlaknaste i kristalne strukture, gljivice, bakterije i parazite.

stanice

• Alveolarni makrofagi su stanice retikulogistocitnog porijekla. Veliki broj makrofaga u ispljuvaju se u kroničnim procesima i u fazi rješavanja akutnih procesa u bronhopulmarnom sustavu. Alveolarni makrofagi koji sadrže hemosiderin ("stanice srčanih defekata") otkrivaju se s blagim infarktom, hemoragijom, stagnacijom u malom krugu cirkulacije. Makrofagi s kapljicama lipida znak su opstruktivnog procesa bronha i bronhiola.
• Xantom stanice (masni makrofagi) nalaze se u apscesu, aktinomikozi, einkinokokozi pluća.
• Stanice cilindričnog ciliiranog epitela su stanice sluznice laringusa, dušnika i bronha; nalaze se u bronhitisu, traheitisu, bronhijalnoj astmi, malignih neoplazmi pluća.
• Ravni epitel se otkriva kada usta ulazi u iskašljanje, nema dijagnostički značaj.
• Leukociti u jednoj ili drugoj količini prisutni su u bilo kojem sputumu. Veliki broj neutrofila detektira se u mukopurulentnom i gnjevnom ispljuvju. Eozinofili su bogati sputumom kod bronhijalne astme, eozinofilne upale pluća, plućnih glutationnih pluća i infarkta pluća. Eozinofili se mogu pojaviti u ispljuvku zbog tuberkuloze i raka pluća. Limfociti u velikom broju nalaze se u kašlju i, rjeđe, tuberkuloze.
• Eritrociti. Detekcija pojedinačnih crvenih krvnih stanica u ispljuvaju nije dijagnostički značajna. U prisutnosti svježe krvi u ispljuvku određuje nemodificirane eritrocita, ako sputuma krvi poteze, koji se nalazi u respiratornom traktu za dugo vremena, otkriti ispranog eritrocita.
• Stanice malignih tumora nalaze se u malignim novotvorinama.

vlakna

• Elastična vlakna pojavljuju se u propadanju plućnog tkiva, što je popraćeno uništavanjem epitelnog sloja i otpuštanjem elastičnih vlakana; oni se nalaze u tuberkulozi, apscesu, ehinokokozi, neoplazmi u plućima.
• Coronalna vlakna su otkrivena u kroničnim bolestima pluća, kao što je kvarcna tuberkuloza.
• Kalcinirana elastična vlakna su elastična vlakna impregnirana s kalcijevim solima. Njihovo otkrivanje u ispljuvju karakteristično je za razgradnju tuberkularnog petrichitisa.

Spirale, kristali

• Kursorske spirale se formiraju u spastičnom stanju bronha i prisustvu sluzi u njima. Tijekom širenja kašlja, viskozna sluz se oslobađa u lumen većeg bronca, uvijanje u spiralu. Kurshmanove spirale pojavljuju se s bronhalnom astmom, bronhitikom, tumorima pluća, kompresijom bronha.
• Kristali Charcot-Leiden su proizvodi propadanja eozinofila. Obično se pojavljuju u ispljuvku koja sadrži eozinofile; su karakteristične za bronhijalnu astmu, alergijske uvjete, eozinofilne infiltrate u plućima, plućne flukove.
• Kristali kolesterola pojavljuju se s apscesom, plućnom ehinokokozom, neoplazmama u plućima.
• Kristali hematoidina karakteristični su za apsces i gangrenu pluća.
• Droni aktinomiketa otkriveni su u aktinomikozi pluća.
• Elementi ehinokoka pojavljuju se s ehinokokozom pluća.
• Korkovi Dietrich - hrpe žućkasto-sive boje, s neugodnim mirisom. Oni se sastoje od detritusa, bakterija, masnih kiselina, kapljica masnoća. Oni su tipični za apsces pluća i bronhiectasis.
• Ehrlichov tetrad sastoji se od četiri elementa: kalcificirani detritus, kalcificirana elastična vlakna, kolesterolni kristali i mycobacterium tuberculosis. Pojavi se u propadanju kalcificiranog primarnog tuberkularnog fokusa.

Mikelij i pupiće gljivičnih stanica pojavljuju se u gljivičnim lezijama bronhopulmonalnog sustava.

Pneumocystis se javlja kod pneumocystis pneumonije.

Spherule gljivica otkrivene su u kokcidioidomikozi pluća.

Ascaridne larve su otkrivene s ascariasisom.

Larve crijevnih ugristika identificirane su s strongyloidijalizom.

Jaja pluća su identificirane s paragonimozom.

Elementi pronađeni u ispljuvaju u bronhijalnoj astmi. Kada bronhijalna astma obično odvaja malu količinu mukoze, viskoznog iskašljaja. Makroskopski možete vidjeti Kurshmansku spiralu. Kada je mikroskopsko istraživanje karakteristično za prisutnost eozinofila, cilindričnog epitela, postoje kristali Charcot-Leiden.